摘要: 为明确各种植物次生物质对橘小实蝇Bactrocera dorsalis（Hendel）抗药性的影响，本研究以室内选育的橘小实蝇对敌百虫高抗品系为研究对象，使用不同剂量的芸香苷、槲皮素、2-十三烷酮、单宁酸等4种植物次生物质分别连续饲喂3代该品系成虫和幼虫，采用药膜法测定毒力，获得抗性倍数和抗性增长率，分析明确植物次生物质种类、剂量与橘小实蝇抗药性发展之间关系。研究结果表明4种物质中较高浓度芸香苷处理橘小实蝇对敌百虫的抗性明显增强，总体呈现处理代次越多抗药性增强程度越大的趋势。F₁代0.05%、0.25%芸香苷剂量处理抗性倍数分别为198.05、172.13,明显高于对照（110.61）,抗性增长率分别为1.79、1.56;F₂代0.01%、0.05%、0.25%剂量处理抗性倍数由对照的89.49分别增大至137.20、146.38、171.48,其抗性增长率分别为1.53、1.64、1.92;F₃代0.01%、0.05%、0.25%剂量下抗性倍数由对照的61.33分别增大至128.12、137.23、211.36,其抗性增长率明显增大（2.09、2.24、3.45）。部分浓度单宁酸处理增强或者降低了橘小实蝇对敌百虫的抗性，F₁代0.002%浓度处理时抗性增长率为1.60,而F₂代0.25%、F₃代0.05%、0.25%浓度处理时抗性增长率降低至0.68、0.70和0.67。槲皮素、2-十三烷酮多个浓度处理多代均未对橘小实蝇抗敌百虫品系的抗药性产生影响。本研究显示一些植物次生物质可对橘小实蝇抗药性产生正面或者负面的影响，其作用与物质种类、浓度、接触时间等有关。

摘要: 【目的】提供一种用于提高橘小实蝇Bactrocera dorsalis中的RNA干扰(RNA interference, RNAi)效率和双链RNA(double-stranded RNA, dsRNA)稳定性的纳米复合物及其制备方法与应用手段。【方法】采用琼脂糖凝胶阻滞实验(agarose gel shifting test)检测橘小实蝇成虫血淋巴对dseGFP的降解能力，星形阳离子聚合物(star polycation, SPc)与dseGFP结合的最佳质量比，以及SPc对dseGFP的保护作用。通过向橘小实蝇成虫腹部注射常用于dsRNA递送体系的表面活性剂烷基糖苷(alkyl polyglucoside, APG),计算死亡率，评估其毒性。在体外合成的dshsp68与纳米载体SPc混合后，用显微注射的方法将纳米复合物注射入橘小实蝇成虫的腹部，运用RT-qPCR检测RNAi效率。【结果】琼脂糖凝胶电泳结果显示橘小实蝇血淋巴能迅速降解dseGFP,当SPc与dseGFP的质量比大于或等于1∶1时能自发形成SPc/dseGFP纳米复合物，减缓橘小实蝇血淋巴对dseGFP的降解。表面活性剂APG对橘小实蝇成虫毒性较强，注射APG后48 h时橘小实蝇的平均死亡率为78.33%,不适宜作为注射法的助剂。单独注射dshsp68后48 h时的RNAi效率为49.53%,在72 h时失去RNAi效果，而注射SPc/dshsp68纳米复合物的RNAi效率更高，48 h时达到了85.99%,且在72 h时的RNAi效率为40.87%,具有更长的RNAi持效时间。【结论】SPc可以结合dsRNA形成复合物，减缓dsRNA被橘小实蝇血淋巴RNase的降解，从而实现持续高效的RNAi敲降效果。本研究建立了一种通过纳米载体SPc实现高效RNAi的方法，可以用于橘小实蝇基因功能研究。

摘要: 【目的】针对全球重要果蔬害虫橘小实蝇Bactrocera dorsalis,基于雄性引诱剂的雄性歼灭技术(male annihilation technique, MAT)已被广泛应用，其中甲基丁香酚(methyl eugenol, ME)作为核心引诱剂，对雄虫表现出高效的引诱作用。然而，现有技术主要针对雄虫，雌虫对ME的行为反应及其嗅觉感知能力尚不明确，成为限制以ME为基础的雌性引诱剂全面优化的瓶颈。因此，本研究旨在系统揭示橘小实蝇雌成虫对ME的行为反应及嗅觉感知能力，探索ME在橘小实蝇雌虫中的潜在生物学作用，为优化应用ME的雌虫防控策略提供新的研究思路。【方法】为明确橘小实蝇雌成虫对ME的行为反应和感知能力，选择生理状态活跃的12日龄雌雄成虫作为试虫，首先利用嗅觉陷阱实验与四臂嗅觉仪实验测试了橘小实蝇雌雄成虫对剂量为1 000和100μg的ME以及具有类似诱雄功能的2-烯丙基-4,5-二甲氧基苯酚(2-allyl-4,5-dimethoxy phenol, DMP)的趋向行为，对剂量为1 000μg ME和DMP的取食行为；其次利用触角电位(electroantennogram, EAG)反应实验测定剂量为0.1,1,10和100μg的ME和DMP引起的橘小实蝇雌雄成虫的EAG反应；最后利用单感器技术(single sensillum recording, SSR)记录了橘小实蝇雌雄成虫触角上锥形感器对ME和DMP的SSR反应。【结果】行为学测试结果表明，橘小实蝇雌成虫未对ME和DMP表现出明显的趋向行为或取食倾向，而雄成虫表现强烈的行为反应。然而，EAG实验则显示，橘小实蝇雌成虫与雄成虫类似，对ME和DMP均产生了显著的嗅觉响应；进一步的SSR实验发现，橘小实蝇雌成虫具有与雄成虫类似的嗅觉感器，负责ME和DMP的感知。【结论】本研究结果提示，橘小实蝇雌成虫具备与雄成虫类似的ME嗅觉感知机制，但ME对雌成虫的行为的影响不同于对雄成虫的诱集功能，ME对雌成虫可能具有其他潜在的生物学作用。这些结果为深入理解橘小实蝇对ME的感知与行为反应提供了新的实验依据，同时为改良雌虫行为调控技术提供了理论参考。

摘要: 【目的】离子型受体(ionotropic receptors, IRs)在昆虫的嗅觉、味觉、温度和湿度感受等方面起到重要的作用。本研究结合转录组数据在全基因组水平上对橘小实蝇Bactrocera dorsalis离子型受体基因家族进行鉴定，为进一步研究橘小实蝇离子型受体基因功能提供理论基础。【方法】利用隐马尔可夫模型、多序列比对、基因结构域分析和系统发育分析在橘小实蝇全基因组中鉴定IR基因。利用TBtools对IR基因家族进行染色体定位、基因全长结构、蛋白保守基序和共线性分析，并通过EasyCodeML计算进化压。利用Hisat2及Stringtie软件计算分析橘小实蝇IR基因在外周神经组织(触角、口器、前足、中足、后足和生殖器)中的表达模式，并利用qPCR进行验证。【结果】在橘小实蝇全基因组中共鉴定获得39个候选IR基因，全部位于常染色体上，其中26个IR基因获得了转录组支持的CDS全长结构；全长IR基因共享2～8个相同的蛋白保守基序，说明其结构的保守性；28个候选IR基因与果实蝇属Bactrocera其他实蝇的IR基因存在共线性关系，其中1个IR基因受到强烈的负选择；17个候选IR共线性基因在橘小实蝇外周神经组织中表达，其中10个IR基因仅表达于触角，2个IR基因仅表达于口器，1个IR基因仅表达于产卵器。另外，1个IR基因仅在触角和雄性生殖器中表达，1个IR基因除产卵器不表达其余组织都表达，2个IR基因在所有外周神经组织中都表达，另有6个IR基因存在雌雄表达差异，其他11个候选IR基因在外周神经组织中无表达。【结论】本研究利用基因组和转录组数据对橘小实蝇离子型受体基因家族进行了系统鉴定，并对该基因家族成员的结构特征、进化关系和表达模式进行了分析，为进一步研究橘小实蝇离子型受体基因的功能提供了理论基础。

摘要: 【目的】基于线粒体基因组数据，明晰云南省橘小实蝇Bactrocera dorsalis种群遗传多样性和遗传结构，揭示其在云南的扩散路径，为橘小实蝇防控策略的制定和规划提供理论依据。【方法】2022年7-9月收集云南省橘小实蝇15个地理种群，使用DNBSEQ-T7平台进行线粒体基因组测序、组装与注释；基于13个蛋白质编码基因(protein-coding genes, PCGs)序列使用MEGA-X 10.0.5, DnaSP 6.12和Arlequin 3.5.2软件分析种群遗传多样性与遗传分化；基于13个PCG和COI序列使用最大似然法构建系统发育树，使用PopART4.8.4软件构建单倍型网络；通过中性检验和错配分布分析种群历史动态。【结果】共获得云南橘小实蝇15个地理种群149条线粒体全基因组，包含共1 697个变异位点，总体表现出高水平的遗传多样性(Pi=0.00783,K=87.591,Hd=0.9994);种群间遗传距离为0.00702～0.00874,遗传分化指数为-0.02345～0.05203;系统发育树和单倍型网络均未呈现出明显的种群结构；橘小实蝇云南种群历史上发生过扩张，云南西部和南部为橘小实蝇最早入侵区域，北部地区橘小实蝇入侵时间较晚。【结论】云南省橘小实蝇不同组群均呈现出高水平遗传多样性和弱遗传结构，线粒体基因组变异位点丰富且广泛分布在所有种群中，不同地理种群间没有明显分化，推测橘小实蝇由云南西部及南部向北部地区扩散。