摘要: 【目的】揭示东方蜜蜂微孢子虫Nosema ceranae侵染对意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica工蜂的影响，为深入开展二者互作研究提供科学依据。【方法】采用Percoll不连续密度梯度离心法制备东方蜜蜂微孢子虫纯净孢子，接种羽化出房的意大利蜜蜂工蜂后制备中肠样品，通过PCR扩增东方蜜蜂微孢子虫16S rRNA和actin基因，验证接种7 d时意大利蜜蜂工蜂成虫中肠中东方蜜蜂微孢子虫的侵染有效性；利用数字PCR检测东方蜜蜂微孢子虫侵染1, 4, 7和11 d时Hsp70的拷贝数。观测和比较东方蜜蜂微孢子虫接种组及未接种组意大利蜜蜂工蜂成虫的蔗糖溶液消耗量和存活率。【结果】东方蜜蜂微孢子虫接种的意大利蜜蜂工蜂成虫中肠样品中能够扩增出符合预期大小的16S rRNA和actin基因；接种后1, 4, 7和11 d时在单头意大利蜜蜂工蜂成虫中肠中鉴定到Hsp70的拷贝数分别为36.67, 386.67, 480和25 095.33;意大利蜜蜂单头工蜂成虫在接种东方蜜蜂微孢子虫后4-13 d时的平均日蔗糖溶液消耗量[(0.0313±0.0041) g]均高于未接种对照组的[(0.0219±0.0049) g],其中在4, 5, 9和11 d时单头工蜂成虫日蔗糖溶液消耗量两组间差异显著；意大利蜜蜂工蜂成虫存活率在东方蜜蜂微孢子虫接种1-5 d时与未接种对照组中均为100%,意大利蜜蜂工蜂成虫在接种东方蜜蜂微孢子6 d时出现死亡，而未接种对照组工蜂成虫在7 d时出现死亡；意大利蜜蜂工蜂成虫在接种东方蜜蜂微孢子虫6-13 d时的存活率均低于未接种对照组的。【结论】东方蜜蜂微虫在意大利蜜蜂工蜂中肠中持续增殖，对宿主造成明显的能量胁迫，进而缩短了宿主寿命。