摘要: 目的 探讨微RNA (microRNA,miRNA或miR)-887-3p对大鼠椎间盘纤维环细胞增殖和凋亡的影响及其潜在的分子机制。方法 取8周龄SPF级雄性SD大鼠的纤维环组织，离心制备并鉴定纤维环细胞。实验随机分为4组：正常组（Normal group）是不做任何处理的原代纤维环细胞；对照组（Control group）用10 ng/mL白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)处理纤维环细胞24 h，形成退变细胞模型；干扰组（miR-887-3p inhibitor）是在对照组的基础上用Lipo3000转染miR-887-3p抑制子；过表达组（miR-887-3p mimics）是在对照组的基础上用Lipo3000转染miR-887-3p模拟物。采用CCK-8法检测各组细胞活力；流式细胞术检测各组细胞凋亡率；实时荧光定量PCR法检测miR-887-3p和鼠双微体4 (murine double minute 4,MDM4) mRNA的表达；蛋白质印迹法检测MDM4、Bcl-2和Caspase-3的蛋白表达水平。结果 免疫荧光染色法鉴定分离培养的细胞发现，大鼠椎间盘纤维环细胞中Collagen I的阳性率在90%以上，提示纤维环细胞纯度大于90%。实时荧光定量PCR结果显示，利用IL-1β构建纤维环退变细胞模型后，miR-887-3p表达水平与正常组相比显著上升（P<0.001）；与对照组相比，转染miR-887-3p抑制子后，miR-887-3p表达水平显著下降（P<0.001）。CCK-8法检测结果表明，与正常组相比，对照组细胞活力显著下降（P<0.001）；与对照组相比，抑制miR-887-3p的表达后，细胞增殖能力显著增强；miR-887-3p过表达后，细胞增殖能力显著下降。流式细胞仪检测结果表明，与正常组相比，对照组的细胞凋亡率显著增加（P<0.001）；与对照组相比，miR-887-3p干扰组的细胞凋亡率显著降低（P<0.001）,miR-887-3p过表达组的细胞凋亡率显著增加（P<0.001）。蛋白质印迹法检测结果发现，与正常组相比，对照组中Bcl-2的表达水平显著降低（P<0.001）,Caspase-3的表达水平显著升高（P<0.001）；与对照组相比，miR-887-3p干扰组中Bcl-2和MDM4表达水平显著升高（P<0.01）,Caspase-3的表达水平显著降低（P<0.01）；而miR-887-3p过表达组中Bcl-2和MDM4表达水平显著降低（P<0.05）,Caspase-3的表达水平显著升高（P<0.05）。实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹结果显示，干扰miR-887-3p后，MDM4蛋白和mRNA的表达增加（P<0.001）；过表达miR-887-3p后，MDM4蛋白和m RNA的表达降低（P<0.01,P<0.001）。结论 miR-887-3p可能通过调控MDM4的表达来影响大鼠椎间盘纤维环细胞的增殖和凋亡，进而影响椎间盘退变的发生和发展。

摘要: 目的 用同种异体移植的方法构建大鼠子宫内膜异位症模型，并评价促性腺激素释放激素（gonadotropinreleasing hormone,GnRH）激动剂GenSci006对实验大鼠子宫内膜异位症模型的影响。方法 取供体SPF级雌性SD大鼠的子宫内膜移植于受体雌性大鼠的腹腔壁上，构建同种异体的子宫内膜异位症模型。3周后，测量异位内膜的长、宽、高，计算给药前异位内膜的体积V₁。将进行假手术操作的大鼠设为假手术组，将造模大鼠随机分为模型组、曲普瑞林组（0.25 mg/kg）、GenSci006-1组（0.125 mg/kg）和GenSci006-2组（0.25 mg/kg）共4组，每组大鼠16只。各组大鼠单次给予相应的药物，假手术组和模型组给予同等体积的溶剂。3周后，再次测量异位内膜，计算给药后异位内膜的体积V₂和抑制率；通过比较脏器系数及病理切片的变化，判断GenSci006对大鼠子宫和卵巢组织的影响；ELISA法测定血清中雌二醇（estradiol,E₂）、孕酮（progesterone,P₄）、卵泡刺激素（follicle stimulating hormone,FSH）和黄体生成素（luteinizing hormone,LH）水平的变化；实时荧光定量PCR法测定下丘脑和垂体中GnRH受体（GnRH receptor,GnRHR） mRNA的表达水平。蛋白质印迹法检测异位内膜组织中雌激素受体（estrogen receptor,ER）α、ERβ和孕激素受体（progesterone receptor,PR）蛋白的表达。结果 给药3周后发现，与模型组相比，曲普瑞林组和GenSci006-2组大鼠的体重显著增加（P<0.05），而异位内膜的体积显著减小（P<0.05）。与假手术组相比，模型组子宫、卵巢脏器系数及子宫内膜厚度无明显变化（P>0.05）；与模型组相比，曲普瑞林组和GenSci006-2组子宫脏器系数及子宫内膜厚度显著降低（P<0.05）。与假手术组相比，模型组血清中E₂、P₄、FSH、LH水平无明显变化（P>0.05）；与模型组相比，曲普瑞林组、GenSci006-1组和GenSci006-2组大鼠的卵巢脏器系数和血清P₄水平均显著降低（P<0.05），而GenSci006-1组大鼠的血清LH水平明显升高（P<0.05），但各组血清E₂和FSH水平并无显著变化（P>0.05）。与模型组相比，曲普瑞林组和GenSci006-2组大鼠垂体GnRHR mRNA表达水平显著下调（P<0.05）；各组大鼠下丘脑组织中GnRHR mRNA表达及异位内膜组织中ERα、ERβ、PR蛋白表达水平无明显变化（P>0.05）。结论 大鼠同种异体子宫内膜异位症模型适宜作为筛选和评价子宫内膜异位症治疗药物的动物模型，而且异位内膜体积、抑制率、子宫及卵巢脏器系数、血清E₂水平均可作为检测药物疗效的指标。

摘要: 目的 通过Meta分析评价葛根素对大鼠和小鼠骨密度的影响。方法 通过中国知网、中国生物医学文献、万方、维普、PubMed、EMBase、Web of Science、Cochrane图书馆、Scopus数据库中自建库至2023年11月6日收录的有关葛根素治疗对大鼠和小鼠骨密度影响的文献。文献纳入标准包括研究类型为随机对照试验（对照为安慰剂或空白组），研究对象为大鼠或小鼠，干预措施为葛根素，结果包含骨密度检测。文献排除标准包括葛根素联合其他药物治疗，没有原始研究数据，未公开发表，骨密度检测部位为下颌骨。采用SYRCLE's RoB工具对纳入文献中的研究进行风险偏倚评估，采用Stata 16.0和Rev Man 5.3软件进行Meta分析。结果 经数据库检索共获得429篇文献，根据纳入及排除标准最终纳入42篇文献。纳入文献中涉及41项研究，共925只动物纳入数据分析。与对照组相比，葛根素可改善大鼠和小鼠的骨密度：股骨37项研究，n=824，标准化均数差（standardized mean difference,SMD）=2.12,95%置信区间（confidence interval,CI）=1.69～2.54,P <0.000 1]、腰椎（13项研究，n=271,SMD=2.25,95%CI=1.49～3.01,P <0.000 1）、胫骨（4项研究，n=95,SMD=0.94,95%CI=0.05～1.83,P=0.04）和全身（4项研究，n=94,SMD=1.89,95%CI=0.50～3.29,P=0.008）的组间骨密度差异均具有统计学意义。结论 葛根素能够改善大鼠和小鼠的骨密度，本研究可以为葛根素防治骨质疏松症的临床研究提供良好的参考。

摘要: 目的 建立更准确、灵敏的液相色谱紫外（liquid chromatography-ultraviolet,LC-UV）检测大鼠血清尿酸的方法，并将该方法与市售试剂盒的检测结果进行比较，为氧嗪酸钾诱导的大鼠高尿酸血症模型中血清尿酸含量的准确测定提供新方法。方法 采用向SPF级雄性SD大鼠腹腔注射氧嗪酸钾（300 mg/kg）的方法建立高尿酸血症大鼠模型，对照组给予等量的0.5%羧甲基纤维素钠溶液。经眼眶后静脉丛采血，离心获得大鼠血清样品，经0.1%三氟乙酸-乙腈（含内标3,4-二羟基苄胺氢溴酸盐）沉淀后，取上清液进样分析。采用Waters XBridge HILIC色谱柱（150 mm×4.6 mm,3.5μm）对尿酸进行分离，使用乙腈（含0.5%甲酸与2 mmol/L甲酸铵）作为有机相，甲醇溶液（甲醇∶水=1∶1，含0.5%甲酸与2 mmol/L甲酸铵）作为水相，进行等度洗脱，于290 nm波长处进行检测。使用活性炭处理的血清样品作为空白生物基质，用于方法学验证。分别使用所建立的LC-UV方法与两种市售试剂盒（尿酸酶法和磷钨酸法）检测高尿酸血症模型大鼠的血清尿酸水平，并对3种检测方法的准确度进行比较。结果 大鼠血清中的尿酸在10～200μg/mL质量浓度内线性关系良好（R>0.999），定量下限为10μg/mL，准确度为-2.17%～2.21%，批内精密度为0.52%～1.95%，批间精密度为3.04%～4.90%，提取回收率为83.12%～89.91%。在氧嗪酸钾诱导的大鼠高尿酸血症模型中，市售的磷钨酸法试剂盒测定结果显著高于LC-UV法测定结果，市售的尿酸酶法试剂盒测定结果显著低于LC-UV法测定结果，但LC-UV方法的加样回收率结果最佳（95.90%～99.96%）。结论 所建立的LC-UV方法能够准确测定大鼠血清中尿酸含量，与市售试剂盒相比具有更高的准确度，推荐作为氧嗪酸钾诱导的大鼠高尿酸血症模型中血清尿酸含量的检测方法。

摘要: 目的 全面评价碘酸钠腹腔注射对SD大鼠生理指标和视网膜组织病理学特征的影响。方法 选取64只SD大鼠随机分为阴性对照组和模型组，每组32只，雌雄各半。模型组以10 mL/kg剂量腹腔注射碘酸钠（6 mg/mL） 1次，阴性对照组以10 mL/kg剂量腹腔注射生理盐水注射液1次。每天观察大鼠一般体征，注射当天（0天）和注射后第2、6、9、13、16、20、23、27、29、36、43、50、57天称量所有存活大鼠体质量；注射后第3、7、21、28、41、62天随机选取大鼠（第28天为12只/组，其余为4只/组，均为雌雄各半）进行血清生化学指标检测，系统解剖摘取脏器称重，然后对主要脏器和组织进行HE染色，以及眼HE和TUNEL染色；注射后第28、62天进行血常规指标检测。结果 注射碘酸钠后，模型组88%的大鼠出现一过性稀便，观察期间大鼠体质量增长稍缓且以雄鼠较明显。注射后第28天模型组雌鼠红细胞容积（red blood cell volume,RDW）和雄鼠尿素氮（urea nitrogen,BUN）、网织红细胞计数（reticulocyte count,Retic#）及百分比（reticulocyte percentage,Retic%）均升高，与阴性对照组比较的差异均有统计学意义（均P<0.05）。雌雄鼠白细胞（white blood cells,WBC）、红细胞（red blood cells,RBC）、血红蛋白（hemoglobin,HGB）、红细胞比容（hematocrit,HCT）均有降低趋势，但组间差异均没有统计学意义（均P>0.05）。模型组雄鼠胸腺重量、系数除注射后第7天大于阴性对照组外，其余时间点均小于阴性对照组，但组间差异均没有统计学意义（均P>0.05）。组织病理学检查可见模型组大鼠视网膜由波浪状改变逐步发展为异常心电图样改变，各层排列紊乱，外核层局灶性变薄，视网膜外核层细胞凋亡；病变发生率、病变评分和凋亡细胞数量均明显高于或多于同时期的阴性对照组，第28天的组间差异有统计学意义（均P<0.01）。结论 碘酸钠腹腔注射除可使大鼠视网膜变性外，对血清生化、血常规部分指标也有一定程度的影响，还出现大鼠体质量增长略缓慢和一过性粪便性状改变的现象。因此，在使用该模型开展药物安全性评价时，应关注造模试剂对动物的影响。