摘要: 目的 动态观察经大鼠足背静脉注射长春瑞滨溶液诱导静脉炎模型的临床症状和病理变化。方法 28只11周龄雄性SPF级SD大鼠随机分为模型组（20只）和对照组（8只）：模型组经右后肢足背静脉单次注射0.1 mL长春瑞滨溶液（4 mg/mL），对照组同法注射等体积生理盐水。每日观察两组大鼠的静脉炎发生情况并记录其分级，采用排水法测量患肢体积并计算肿胀率，双足平衡测痛仪测试患肢承重占比，红外热像仪检测患肢皮肤温度，连续9 d。模型组从第1天起隔日处死3只大鼠，取从注射点至向心端1 cm处的静脉组织，采用苏木精-伊红染色法观察静脉组织病理学改变，用扫描电子显微镜观察血管内膜表面微观结构变化。结果 与对照组大鼠比较，模型组大鼠第1天出现红肿，至第3天肿胀率达到（81.89±15.75）%(P<0.001)，而后红肿逐渐缓解，至第9天降至（15.41±0.33）%(P<0.01)；模型组大鼠患肢第1天出现痛觉，至第3天明显加剧，承重占比降低至（36.35±4.91）%(P<0.001)，同时患肢病灶皮肤发热，第5天明显升高至（36.36±0.40）℃（P<0.001），痛觉和发热在第9天均基本恢复至正常。模型组大鼠患肢静脉炎分级显示，第1天Ⅱ级占75.0%；第3天Ⅲ级、Ⅳ级各占37.5%；第5～9天多数出现条索状静脉，以Ⅲ级为主。患肢静脉组织从第1天的周围水肿和炎性细胞浸润，逐渐进展为第3～9天的内膜破溃、管壁增厚，甚至管腔狭窄；同时静脉内膜亦从内皮细胞紧密连接破坏、血细胞粘附，进展为内膜表面粗糙、褶皱及隆起。结论 经后肢足背静脉单次注射0.1 mL长春瑞滨溶液（4 mg/mL）建立的静脉炎大鼠模型在第3～5天以局部红、肿、热、痛为典型特征，至第9天基本消退，但仍可见条索状静脉；随病程延长，静脉组织出现水肿、管壁增厚及管腔狭窄，静脉内膜破溃、表面粗糙甚至完全缺失。

摘要: 目的 建立大鼠骨关节炎模型，研究秦皮素对骨关节炎大鼠的抗炎作用及机制。方法 18只8周龄雄性SPF级SD大鼠随机分为3组：空白组大鼠右膝关节腔注射50μL生理盐水并连续1周；模型组和干预组大鼠右膝关节腔注射碘乙酸钠（monosodium iodoacetate,MIA）造模，干预组再注射秦皮素(5 mg·kg^-1·d^-1)并连续干预1周。药物干预后4周，采集腹主动脉血，安乐死动物后采集膝关节软骨。采用苏木精-伊红染色、番红O-固绿染色和甲苯胺蓝染色进行膝关节软骨的组织病理学观察以及Mankin和OARSI评分，并用micro-CT扫描系统比较分析每组膝关节的骨体积分数、骨表面积密度和骨小梁数目。采用酶联免疫吸附试验法检测各组大鼠血清中多种炎症因子[肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素1β（interleukin-1β,IL-1β）、白细胞介素6（interleukin-6,IL-6）]以及软骨寡聚基质蛋白（cartilage oligomeric matrix protein,COMP）的表达。采用蛋白质印迹法测定膝关节软骨中丝裂原活化蛋白激酶p38（mitogen-activated protein kinase p38,p38 MAPK）、磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38（phosphorylation-p38 MAPK,p-p38 MAPK）、c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）、磷酸化JNK氨基末端激酶（phosphorylation-JNK,p-JNK）的表达。结果 大鼠膝关节软骨切片染色显示，模型组的关节面缺损严重，干预组的软骨破坏相对减轻。micro-CT显示，干预组的骨体积分数、骨表面积密度和骨小梁数目均明显高于模型组（P<0.05）；模型组的Mankin评分明显高于空白组（P<0.05），干预组的Mankin评分明显低于模型组（P<0.05）；而干预组的OARSI评分明显低于模型组（P<0.05）。酶联免疫吸附试验结果显示，模型组大鼠血清中TNF-α、IL-1β、IL-6和COMP含量均明显高于空白组（均P<0.05），而干预组含量明显低于模型组（均P<0.05）。蛋白质印迹结果显示，干预组膝关节软骨组织中p-p38 MAPK和p-JNK表达水平明显低于模型组（均P<0.05），而模型组的p-p38 MAPK和p-JNK蛋白表达水平明显高于空白组（均P<0.05）。结论 秦皮素药物干预可能通过p38 MAPK通路对碘乙酸钠诱导的骨关节炎模型大鼠发挥治疗作用。

摘要: 目的 通过模拟排卵功能障碍型异常子宫出血（abnormal uterine bleeding-ovulatory dysfunction,AUB-O）病因，建立异常子宫出血大鼠模型，为异常子宫出血病理机制研究及治疗药物开发提供可靠的模型支持。方法 将24只成年（10周龄）雌性SD大鼠适应性饲养后，随机分为正常对照组（6只）和模型组（18只）。正常对照组大鼠在屏障环境中正常饲养；模型组大鼠在屏障环境中经背侧入路行双侧卵巢切除术，休养1周后开始造模用药。模型组造模第1～3天每日每只大鼠背部皮下注射雌二醇0.5 mg，第4～7天每日皮下注射孕酮5.0 mg；同时于第6天经背侧相同手术切口向双侧子宫腔各注射0.5 mL大豆油，于第8天行米非司酮（10 mg/kg）灌胃，造模期间持续观察大鼠所处动情周期的阶段及其变化趋势。造模后48 h内观察并记录大鼠子宫出血情况，米非司酮灌胃后0、12、24、36、48 h模型组动态收集血清和子宫组织样本，正常对照组在36 h同时取材。取材后分别进行HE染色、血清性激素ELISA测定、免疫组织化学检测、TUNEL凋亡染色、蛋白质印迹检测、转录组学测序和生物信息学分析，对异常子宫出血大鼠模型进行综合评价。结果 异常子宫出血大鼠表现为子宫出血，内膜剥脱损伤、复旧不全，内膜炎性细胞浸润、凋亡增强，间质、腺体和血管结构破坏。与正常对照组相比，异常子宫出血大鼠的血清卵泡刺激素、雌二醇和促黄体生成素水平明显升高（P<0.05）；子宫内膜血管密度明显降低（P<0.05）；血管内皮生长因子在子宫内膜剥脱处表达定性观察到明显增强，而在间质血管周围表达显著下降（P<0.01）；基质金属蛋白酶-9在内膜损伤部位表达定性观察到明显增强，而在未剥脱间质和腺体处表达显著降低（P<0.01）；子宫内膜间质细胞凋亡显著增强（P<0.01）；成纤维细胞生长因子2和内皮素-1在子宫组织中的表达水平均明显下降（P<0.05）。比较异常子宫出血大鼠与正常大鼠子宫组织的转录组测序结果，共筛选到4 723个差异表达基因，其中表达上调基因为2 191个，表达下调基因为2 532个；KEGG富集分析显示，差异基因显著富集在炎症、免疫凋亡、细胞信号转导、增殖分化和肌肉收缩等相关通路。结论 采用雌激素、孕激素和米非司酮序贯给药模拟AUB-O病因的方法，可成功建立异常子宫出血大鼠模型。该模型的子宫内膜损伤与炎症和凋亡相关，病理表现受血管收缩和内膜再生能力异常影响。该大鼠模型具有与临床非结构性病因异常子宫出血相近的病理特征，可以作为研究病理机制和治疗方法的有效模型。

摘要: 目的 通过模拟高催乳素血症及免疫炎症状态，建立非哺乳期乳腺炎（non-puerperal mastitis,NPM）大鼠模型，评价其乳腺局部炎症特征，为乳腺疑难疾病的诊疗研究提供依据。方法 选用SPF级Wistar雌性大鼠12只，均分为对照组和模型组。实验期间，对照组未接受任何实验性操作和药物处理；模型组连续7 d每日皮下注射1次盐酸甲氧氯普胺注射液100 mg/kg，在注射首日后第10、20、30天分别采用ELISA法检测血清催乳素水平。注射7 d后，将200μL哺乳期SD母鼠乳汁混合200μL完全弗氏佐剂制备为油包水乳剂，多点皮下注射至模型组大鼠背部进行首次免疫。首次免疫7 d后，再将油包水乳剂经多点皮下注射至大鼠第3、4、5对乳房进行末次免疫。末次免疫后连续观察乳房外观28 d，计算乳腺结节大小；并于第3、7、14、28天，通过HE染色分析乳腺组织形态学，免疫组织化学法检测CD138表达水平，ELISA法测定乳腺组织中白细胞介素（interleukin,IL）-6、IL-1β、肿瘤坏死因子（tumor necrosis factor,TNF）-α和诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）含量，以综合评价造模情况。结果 模型组大鼠可见乳腺皮肤破溃，并于破溃处闻及恶臭味，触诊及超声下可见乳腺结节形成。HE染色显示，末次免疫后第3天大鼠乳腺组织中正常导管及小叶结构消失，并见大量浆细胞浸润；第7天可见乳腺导管扩张，导管上皮坏死脱落，管周浆细胞、淋巴细胞（以T淋巴细胞为主）浸润明显；第14天时可见大量纤维脂肪组织、小血管及肉芽组织增生，间质内可见散在浆细胞；第28天时炎性细胞浸润、纤维组织增生现象减轻，肉芽肿形成。大鼠在造模成功后第10天、第20天催乳素水平逐渐升高（P<0.05,P<0.001）；模型组大鼠在末次免疫后第3、7、14、28天时，乳腺组织中IL-6和TNF-α含量均较对照组升高（P<0.05）;IL-1β含量在末次免疫后第3、7、14天时较对照组升高（P<0.01），第28天时略低于对照组（P>0.05）;iNOS在末次免疫后第7天显著高于对照组（P<0.001）。结论 成功构建大鼠NPM模型，其乳房局部具有肿块、脓肿、溃疡等表现以及乳腺导管扩张和浆细胞浸润的典型病理特征，可为该临床疑难疾病的诊疗研究奠定基础。

摘要: 目的 建立大鼠中重度膝骨关节炎模型，为中重度膝关节炎发病机制及其防治方法研究奠定基础。方法 选用30只雄性SD大鼠，随机分为3组：假手术组、模型8周组、模型20周组，每组各10只。模型8周组和模型20周组大鼠通过手术切断右膝关节前后交叉韧带和内侧副韧带，去除内外侧半月板，术后大鼠可自由活动。假手术组大鼠仅切开皮肤，暴露关节，不进行手术处理。分别于术后8周和20周进行Micro-CT观察，分析大鼠股骨骨质疏松情况；大鼠安乐死后，对膝关节面进行大体观察，并采用Pelletier评分表对关节面软骨进行评分。膝关节取材，进行HE染色和番红O-固绿染色，观察软骨形态变化，并使用改良Mankin's评分法对关节面组织病理情况进行评分。通过免疫组织化学染色法检测Ⅱ型胶原和基质金属蛋白酶13 (matrix metalloproteinase 13,MMP13)表达情况，以此反映膝关节软骨的合成分解代谢情况。结果 模型8周组和模型20周组大鼠膝关节的关节面软骨破坏严重，Pelletier评分及改良Mankin's评分均明显高于假手术组（均P<0.01）。模型20周组大鼠的Pelletier评分及改良Mankin's评分均明显高于模型8周组（P<0.01）。模型8周组和模型20周组大鼠经Micro-CT观察可见膝关节面不平整，骨赘形成，出现骨质疏松的表现；且模型20周组大鼠的膝关节周围有较多游离体形成。免疫组织化学染色提示模型组大鼠的膝关节组织中MMP13表达量增多，Ⅱ型胶原表达量减少，提示关节软骨合成分解代谢平衡被破坏。结论 通过手术切断大鼠膝关节前后交叉韧带和内侧副韧带并去除内外侧半月板的方法可成功构建中重度膝关节炎大鼠模型，影像学检查发现膝关节骨赘、骨质疏松及游离体，病理学观察发现关节软骨减少甚至消失，而且软骨合成分解代谢平衡破坏。