摘要: 目的通过慢性间歇性低氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)大鼠模型探索阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征与甲状腺功能的关系。方法 SD大鼠分为对照(control)组、CI H组和复氧(reoxygenation,RH)组,利用低氧舱建立CIH动物模型,并对CIH模型进行鉴定;放射免疫检测各组大鼠血清中促甲状腺激素释放激素(thyrotropin releasing hormone,TRH)、促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)、三碘甲状腺原氨酸(triiodothyronine,T3)和甲状腺素(thyroxine,T4)的表达水平;HE染色和甲苯胺蓝染色观察各组大鼠甲状腺组织的病理变化;电子显微镜观察各组大鼠甲状腺组织超微结构的变化。结果 CI H组和RH组大鼠的血氧饱和度为70%～92%,动脉氧分压为60.7～80.1 mmHg,接近阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征的病理生理特点,因此Cl H动物模型建立成功。与control组比较,CI H组大鼠血清中TRH、TSH、T3和T4的表达水平明显降低(均P<0.05),甲状腺质量明显增加(P<0.01);与CI H组比较,RH组大鼠血清中TRH、TSH、T3和T4的表达水平明显增加(均P<0.05),甲状腺质量减少(P <0.05)。HE染色和甲苯胺蓝染色显示,control组大鼠甲状腺组织有完整的甲状腺滤泡;CI H组大鼠甲状腺的正常滤泡结构丧失,一些滤泡细胞显示空泡,基核较暗;RH组大鼠甲状腺组织显示正常的滤泡结构,但是某些滤泡细胞仍呈空泡状,带有深色核。电子显微镜观察发现,control组大鼠的甲状腺具有正常的滤泡细胞;CI H组大鼠甲状腺滤泡细胞的细胞核收缩,异染色质增加,基质损失;RH组大鼠的甲状腺部分有完整的滤泡细胞结构。结论 CI H可导致大鼠甲状腺功能调节紊乱,恢复吸氧可使甲状腺功能部分恢复正常。

摘要: 目的从脑胃饥饿素(ghrelin)通路研究应激影响食欲的分子机制。方法 32只雄性Wistar大鼠随机分为对照组和应激组,每组1 6只,每笼2只。采用夹尾应激方法每日2次,连续2 1 d刺激大鼠,监测各组大鼠的摄食量及体质量;在实验第7、2 1天每组各选取8只大鼠,E L I S A法检测血清酰基化ghrelin质量浓度;蛋白质印迹法检测大鼠胃及下丘脑中ghrelin蛋白表达,以及下丘脑中腺苷酸活化蛋白激酶α2(Amp-activated protein kinaseα2,AMPKα2)表达水平;实时荧光定量PCR检测胃中ghrelin、生长激素促分泌素受体(growth hormone secretagogue receptor,GHSR)、瘦素(leptin),以及下丘脑中ghrelin、AMPKα2、神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)、刺鼠基因相关蛋白(agouti-related protein,AgRP)mRNA水平。结果实验第7天应激组每笼大鼠的总摄食量多于对照组(P <0.05),第21天两组大鼠的总摄食量未见明显差异(P> 0.05);在第7、21天,两组大鼠的体质量均无明显差异(P> 0.05)。应激可以明显上调血清中酰基化ghrelin水平(P <0.01),胃及下丘脑中ghrelin蛋白(P <0.05)以及下丘脑中AMPKα2蛋白(P <0.01)的表达也均明显上调。应激还能明显上调胃内ghrelin及GHSR mRNA水平(P <0.01),下调胃内leptin mRNA水平(P <0.01);同时上调下丘脑内ghrelin、AMPKα2、NPY及AgRP mRNA水平(P <0.01)。结论夹尾应激能导致大鼠中枢及外周ghrelin水平的上调,可能对大鼠食欲暂时性增加有影响。

摘要: 目的比较对氯苯丙氨酸(para-chl orophenyl al ani ne,PCPA)、电刺激应激及PCPA联合电刺激3种不同方法制备的松果体损伤模型,评价松果体结构与功能变化,为建立方法简便、成模时间短的松果体损伤模型提供依据。方法 40只大鼠适应性饲养1周后,随机分为空白对照组、PCPA组、电刺激组及PCPA联合电刺激组。空白对照组不做任何处理;PCPA组大鼠腹腔注射PCPA 450 mg/kg,连续2 d;电刺激组大鼠使用穿梭箱电刺激(电压30 V,电流0.8 A,刺激时间30 s,间隔时间30 s,循环60次),连续5 d;PCPA联合电刺激组大鼠使用电刺激第4天加用PCPA,操作同前。测试各组大鼠旷场活动、高架十字迷宫等行为学以及戊巴比妥钠协同睡眠等指标,ELI SA法检测血清褪黑素(melatonin,MT)水平,镜下观察松果体病理组织结构。结果 3个实验组大鼠旷场活动总距离和平均速度均显著低于空白对照组(P <0.01),PCPA组、PCPA联合电刺激组旷场活动中央区时间显著长于空白对照组(P <0.05),PCPA联合电刺激组进入开放臂次数显著多于空白对照组(P<0.05),PCPA组、PCPA联合电刺激组进入开放臂时间显著长于空白对照组(P<0.05)。PCPA组入睡潜伏期显著长于空白对照组(P <0.05)。3个实验组血清MT水平均显著低于空白对照组(P <0.01)。病理组织学变化:PCPA组松果体细胞排列紊乱,核固缩,数目明显减少,空泡变性增多;电刺激组松果体排列紊乱,核固缩,细胞数目稍减少,空泡变性稍增多;PCPA联合电刺激组松果体细胞排列紊乱,核固缩,数目明显减少,空泡变性增多。结论 3种不同造模方法均可造成大鼠松果体不同程度的损伤,可为制作松果体不同损伤模型提供参考。

摘要: 目的探讨苦参素对实验性自身免疫性甲状腺炎(EAT)大鼠炎性反应、辅助性T淋巴细胞(Th) 1/Th2、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及细胞表面趋化因子受体2(CCR2)信号的影响。方法将75只Lewis大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组和苦参素低、中、高剂量组。用免疫猪甲状腺球蛋白(pTG)诱导建立EAT大鼠模型,苦参素低、中、高剂量组分别灌胃0.2、0.4和0.6 g/kg的苦参素,给药体积2 mL,对照组和模型组均给予等体积生理盐水,隔日1次,共4周。HE染色观察大鼠甲状腺组织形态学变化;ELISA法检测血清中促甲状腺激素(TSH)、抗甲状腺球蛋白抗体(TGAb)和甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb),以及细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-12、IL-4和IL-10水平;蛋白质印迹法检测甲状腺组织中MCP-1/CCR2信号轴。结果与对照组相比,模型组TSH、TGAb、TPCAb、IFN-γ、IL-12、IFN-γ/IL-4、IL-12/IL-10、NF-κBp65及MCP-1、CCR2蛋白水平均明显升高,IL-4、IL-10水平明显降低(均P<0.05);苦参素低、中、高剂量组大鼠TSH TGAb、TPCAb、IFN-γ、IL-12、IFN-γ/IL-4、IL-12/1L-10、NF-κBp65及MCP-1、CCR2蛋白水平均明显降低,IL-4、IL-10水平明显升高(均P<0.05),且呈剂量依赖性。结论苦参素能抑制甲状腺抗体生成,下调Th1型细胞因子,上调Th2型细胞因子,进而降低Th1和Th2比值,并抑制MCP-1/CCR2信号轴,发挥对自身免疫性甲状腺炎大鼠的保护作用。

摘要: 目的探讨1型糖尿病早期大鼠空肠平滑肌的氮能神经和胆碱能神经功能,以及空肠组织形态学变化。方法将雄性S D大鼠随机分为正常对照组和糖尿病模型组,通过腹腔注射链脲佐菌素(streptozocin,STZ)60 mg/kg建立糖尿病大鼠模型。4周后运用电场刺激诱发神经源性收缩反应,并采用离体器官肌张力分析方法观察离体空肠平滑肌的收缩反应,以及氮能神经和胆碱能神经功能的改变;石蜡组织切片行H E染色及免疫组织化学检测,观察空肠组织形态学变化。结果与正常大鼠相比,STZ诱导的糖尿病早期大鼠的空肠肌间胆碱能神经功能受损,而氮能神经功能未见明显变化;糖尿病大鼠空肠组织绒毛杂乱无序且断裂,肌层增厚,杯状细胞减少,绒毛长度与肠隐窝深度之比(绒腺比)减小。结论在STZ诱导后4周的1型糖尿病早期大鼠模型中,空肠组织的神经功能和形态学均发生了明显变化,提示肠道作为糖尿病敏感器官,在糖尿病早期诊断及预防中具有重要的临床参考意义。