摘要: 目的探讨大鼠血清葡萄糖测定分析的影响因素。方法分别用两台生化分析仪、两种方法的试剂或不同保存条件的大鼠血清样品检测葡萄糖水平。结果两台生化分析仪测定大鼠血清葡萄糖的结果差异无统计学意义(P>0.05),相关性良好(相关系数r为0.994);两种方法的试剂测定结果差异显著(P<0.01),但相关性良好(相关系数r为0.999);血清即刻测定与4℃冷藏保存4 h、24 h测定的结果差异均无统计学意义(P>0.05),相关性良好(相关系数r为0.999);血清即刻测定与-20℃、-80℃冷冻保存1个月的测定结果差异显著(P<0.01),相关性良好(相关系数r为0.999)。结论进行大鼠血清葡萄糖测定相关动物实验时,应注意所使用的检测仪器设备、试剂方法、样品保存条件的一致性,保证样品检测过程分析阶段的质量。

摘要: 目的利用人肉芽肿小叶性乳腺炎标本匀浆和完全弗氏佐剂的混悬液构建肉芽肿小叶性乳腺炎动物模型。方法将25只有孕产史的SD大鼠随机分为5组:空白对照组、完全弗氏佐剂组、正常乳腺组织匀浆组、病变乳腺组织匀浆低剂量组和病变乳腺组织匀浆高剂量组,每组5只。病变乳腺组织匀浆组以人肉芽肿性乳腺炎组织匀浆制备的完全弗氏佐剂混悬液,接种于大鼠第3、4对乳腺组织(高剂量组注射0.2 mL,低剂量组注射0.1 mL);正常乳腺组织匀浆组接种肉芽肿性乳腺炎患者的正常乳腺组织匀浆液;空白对照组接种生理盐水(即0.9%NaCl溶液);完全弗氏佐剂组接种完全弗氏佐剂。造模完成后维持饲养14 d,观察组织形态学及HE切片染色后的组织病理学特征,比较肉芽肿小叶性乳腺炎模型的建立效果。结果与空白对照组、完全弗氏佐剂组、正常乳腺组织匀浆组对比,病变乳腺组织匀浆高低剂量组均呈现不同程度的肉芽肿小叶性乳腺炎特有的形态学改变及病理学特征,组间对比差异具有统计学意义(P<0.001)。结论人肉芽肿小叶性乳腺炎标本匀浆和完全弗氏佐剂的混悬液可成功建立肉芽肿小叶性乳腺炎大鼠模型,为该病的病因学研究奠定了基础。

摘要: 目的探讨二甲双胍(metformin,Met)对阿尔茨海默症(Alzheimer's disease,AD)大鼠磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)通路及认知功能障碍的影响。方法取SD大鼠50只,用随机数字表法分为正常组(Normal组)、AD模型组(AD组)、Met低剂量(50 mg/kg)组、Met中剂量(100 mg/kg)组、Met高剂量(200 mg/kg)组,每组10只;除Normal组外,其余各组大鼠均在双侧脑室注射10μL链脲霉素(3 mg/kg)建立AD模型。造模成功后开始给药,Met组灌胃给予相应剂量的Met溶液,Normal组和AD组灌胃给予等量生理盐水,各组连续给药14 d,1次/d。末次给药后用Morris水迷宫试验检测大鼠空间认知功能。处死大鼠,取海马组织,用ELISA法检测海马组织中β-淀粉样蛋白42(β-amyloid protein 42,Aβ42)与磷酸化Tau蛋白(p-tau)含量;用HE染色法观察海马组织中神经元病理变化;用免疫组织化学法检测PI3K阳性表达;用蛋白质印迹法检测海马组织中PI3K、磷酸化Akt(p-Akt)、胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)、糖原合酶激酶-3(glycogen synthase kinase-3,GSK-3)蛋白相对表达水平。结果与Normal组相比,AD组大鼠海马可见神经元细胞排列紊乱、减少等病理损伤,大鼠穿越平台次数、原平台象限游泳距离与总距离的比值、游泳时间与总时间的比值均明显减少(P<0.05),海马组织中PI3K、p-Akt和IRS-1蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),平均逃避潜伏期延长(P<0.05),海马组织Aβ42及p-tau含量、GSK-3蛋白表达明显升高(P<0.05);与AD组相比,Met低、中、高剂量组大鼠海马组织的病理损伤减轻,大鼠穿越平台次数、原平台象限游泳距离与总距离的比值、游泳时间与总时间的比值均明显增加(P<0.05),海马组织PI3K、p-Akt、IRS-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05),平均逃避潜伏期缩短(P<0.05),海马组织Aβ42及p-tau含量、GSK-3蛋白表达明显降低(P<0.05),且Met各剂量组上述指标呈剂量依赖性。结论 Met可激活AD大鼠海马组织PI3K/Akt通路,降低海马组织p-tau、Aβ42含量,改善AD大鼠认知障碍。

摘要: 目的探讨高渗盐水治疗减轻脑出血模型大鼠脑水肿的相关机制。方法 60只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组。在大鼠脑实质注射胎牛血清制作脑出血大鼠模型后,治疗组大鼠经尾静脉泵入10%高渗盐水,0.3 mL/h,共48 h。对比各组大鼠死亡率,取脑组织,肉眼观察其外观与病理学变化;同时,测定各组大鼠的脑含水量、脑组织中基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)与基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(metallopeptidase inhibitor-1,TIMP-1)比例,以及相关紧密连接蛋白claudins、occludin和zonula occludens-1(ZO-1)表达的差异。结果模型组大鼠死亡率和脑组织含水量均明显高于治疗组(均P<0.05)。肉眼观察显示,模型组大鼠脑中线明显从病灶侧移向对侧,治疗组大鼠脑中线未见偏移。显微镜下,治疗组大鼠脑组织水肿明显减轻,炎性细胞渗出明显减少。另外,治疗组大鼠脑组织中MMP-9/TIMP-1比例明显低于模型组,而紧密连接蛋白claudin-5、occludin以及ZO-1均高于模型组(均P<0.05)。结论高渗盐水可通过降低MMP-9/TIMP-1比例,稳定紧密连接蛋白claudin-5、occludin以及ZO-1的表达,维持血脑屏障结构完整性,改善脑出血后脑水肿的严重程度,从而降低实验模型大鼠的死亡率。

摘要: 目的观察耐辐射奇球菌R1（Deinococcus radiodurans R1,DRR1）对SD大鼠的慢性毒性。方法将高浓度（109/mL,LDRH组）和低浓度（107/mL,LDRL组）的DRR1活菌以及高浓度（109/mL,BDRH组）和低浓度（107/mL,BDRL组）的细菌破碎物以1 mL/100 g体质量的剂量灌胃SD大鼠,同时以灌胃相同体积的TGY琼脂培养液（含0.5%胰蛋白胨、0.1%葡萄糖和0.3%酵母提取物）作为对照组（TGY组）;每组16只,雌雄各半,每日灌胃给药1次,连续30 d。每组随机取8只大鼠,用3%戊巴比妥钠0.15 mL/100 g体质量腹腔注射麻醉,收集血液及脏器标本,检测血常规、血清电解质、血清生化指标和脏器系数;主要脏器经体积分数为10%的中性甲醛溶液固定,行HE染色,光学显微镜下观察病理学变化。每组其余8只大鼠于停药14 d后作相同处理,观察DRR1的延迟毒性。实验期内观测大鼠行为、摄食量和体质量等一般情况。结果不同浓度的DRR1活菌及DRR1破碎物给药30 d后,停药即刻及停药14 d后,未见各组大鼠的运动、呼吸异常,未观察到反应迟钝、瞳孔改变、眼球凸出、皮肤颜色改变等异常现象,口、耳、鼻、眼角均未见异常分泌物,排便及形态正常;摄食量、体质量变化和脏器系数与TGY组比较,均无显著改变;白细胞数在给药30 d时显著下降（P<0.05）,停药14 d后恢复至正常水平;红细胞数、红细胞压积和血红蛋白含量无显著变化,淋巴细胞、粒细胞、单核细胞数及其百分比无显著变化,血小板数也无显著变化。停药后即刻血清谷丙转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、总蛋白（TP）、尿酸（UA）、尿素（UREA）、血糖（Glu）、镁（Mg）和磷（P）含量无显著变化,血清谷草转氨酶（AST）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）和乳酸脱氢酶（LDH）在LDRH组显著升高（P<0.05）;经14 d恢复期后,AST、CK降至恢复期TGY组水平,CK-MB仍高于恢复期TGY组（P<0.05）;恢复期的LDH水平与停药即刻比较,显著增高（P<0.05）,与恢复期TGY组比较无显著差异。与TGY对照组比较,给药30 d时血清离子浓度在各给药组间没有显著变化（P>0.05）;停药14 d后,LDRH组血清Cl^-、Ca²⁺降低,Na⁺、pH值升高（P<0.05）;对心、肝、肺和肾的病理学观察均未见明显实质性病变。结论 DRR1活菌及其细菌破碎物对大鼠无实际毒性,该实验为DRR1的拓展应用提供了实验数据。