摘要: 在为期两年的致癌试验中发现空白对照组Han-Wistar大鼠出现1例垂体细胞瘤。临床观察及大体剖检未见明显异常。HE染色结果显示，垂体神经部肿瘤组织呈结节状增生，边界清晰，压迫周围正常组织；肿瘤细胞与神经胶质细胞类似，细胞核呈圆形或卵圆形，细胞质丰富呈嗜酸性或空泡状；肿瘤细胞分化良好，细胞多形性不明显，核分裂象可见；部分肿瘤细胞呈假菊形团状排列。免疫组织化学染色结果显示，胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）及S-100蛋白呈阳性。结合HE染色及免疫组织化学染色结果诊断该肿瘤为自发性良性垂体细胞瘤。

摘要: 目的 建立一套基于多重PCR-连接酶检测反应（ligase detection reaction,LDR）技术的近交系大鼠单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms,SNP）检测方案。方法 在5个品系的SPF级近交系大鼠1～20号常染色体和X染色体上共选取40个大鼠SNP位点，将SNP位点随机分为4组，构建基于多重PCR-LDR技术的近交系大鼠4组SNP位点基因检测方案。采用本方案检测国内另两家大鼠供应商的9个常用大鼠品系。最后，通过第三方实验室对不同DNA聚合酶的扩增效果进行比对，验证本方案的可行性。结果 用所构建的近交系大鼠SNP遗传检测方案测试5个大鼠品系时，各样本的所有位点均得到了良好的扩增结果。采用本方案检测国内另两家大鼠供应商的9个常用大鼠品系时也得到了良好的扩增结果，40个SNP位点在每个近交系大鼠中均为纯合。用3种来源不同的DNA聚合酶同时检测相同大鼠DNA样本的结果显示，Multiplex PCR Kit、AmpliTaq Gold?360 DNA聚合酶、Platinum Ⅱ Taq热启动DNA聚合酶在第1～3组SNP位点均有扩增产物的电泳峰，其中Platinum Ⅱ Taq热启动DNA聚合酶在第4组SNP位点中少了一个扩增产物的电泳峰。另外，不同实验室间的比对结果显示，相同扩增体系的检测结果一致。结论 基于多重PCR-LDR技术成功建立了一套覆盖所有常染色体与X染色体的大鼠SNP检测方案，该方法的稳定性和重复性俱佳。

摘要: 目的 建立一种快速灵敏的金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）检测方法。方法 选择金黄色葡萄球菌特异性基因nuc作为靶基因，设计并合成一对特异性引物和一条TaqMan探针，利用荧光定量PCR技术建立nuc基因的核酸检测方法，并在大鼠、小鼠粪便样本检测中进行应用。结果 对金黄色葡萄球菌和其他非金黄色葡萄球菌菌株中提取的DNA进行荧光定量PCR检测，结果显示金黄色葡萄球菌出现特异性扩增曲线，而其他非金黄色葡萄球菌未出现，表明设计的引物和探针对金黄色葡萄球菌检测具有特异性。将提取的金黄色葡萄球菌DNA进行10倍梯度稀释后测定其灵敏度，结果显示最低检出限是10 fg的DNA量，比普通PCR方法高2个数量级。本研究共检测91份样品，有4份来自同一设施的大鼠样品，扩增曲线为典型的S曲线；将该PCR产物测序并进行BLAST比对，该样本的基因序列与金黄色葡萄球菌的基因序列相似度为100%，表明该样本为金黄色葡萄球菌nuc基因核酸阳性，阳性率为4.40%，与细菌培养法的检测结果一致。核酸提取采用全自动核酸纯化仪，从核酸提取到检测结果判定快速，所需时间小于1.5 h。结论 建立的以nuc为靶基因鉴定金黄色葡萄球菌的qPCR方法，具有快速、灵敏度高和特异性强的优点，可用于实验动物大鼠、小鼠粪便中金黄色葡萄球菌的检测。

摘要: 目的 对供应商来源的实验大鼠、小鼠进行常规微生物监测，为实验动物设施科学管理提供重要依据，确保相关实验结果的可靠性。方法 以复旦大学实验动物科学部为例，在2021年4月到2023年4月间，按照单纯随机抽样原则，对来自7家供应商的大鼠、小鼠进行微生物质量抽检。具体参照国家标准中SPF级实验动物必须排除的微生物指标及其检测方法进行。结果 抽检动物的检测总合格率为80.36%。其中SPF级大鼠抽检合格率为52.63%,SPF级近交系小鼠抽检合格率为82.76%,SPF级远交系小鼠抽检合格率为86.67%,SPF级免疫缺陷小鼠抽检合格率为86.36%。检测不合格的细菌学指标集中在金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、肺炎克雷伯杆菌和啮齿杆菌H型，检出率分别为10.76%、3.16%、2.53%和0.63%。不合格的血清学指标为仙台病毒，发生率为2.53%。此外，除国家标准规定SPF级小鼠必须排除的微生物指标外，还在近交系小鼠中检测到阿米巴原虫和肠杆菌属菌株；在免疫缺陷小鼠中检测到产酸性克雷伯杆菌，检出率分别为1.15%、2.30%和4.55%。结论 供应商来源的大小鼠动物中存在一定的病原体感染发生率，相关动物设施有必要强化实验动物微生物监测，确保接收和饲养动物的质量，这对提高实验结果准确性和保护实验动物从业人员的职业健康具有重要意义。

摘要: 目的 分析卵巢储备功能减退动物模型的造模特点，为卵巢储备功能减退动物模型制备的规范化提供参考。方法 通过检索卵巢储备功能减退动物模型的相关文献，用Microsoft Excel 2010软件归纳文献中记载的实验动物种类、造模方法、造模周期、高频检测指标和阳性药物种类等，并通过NoteExpress软件对数据结果进行评价与分析。结果 纳入符合标准的93篇卵巢储备功能减退动物模型相关文献，其中动物种类多选用SD大鼠（68次，73.12%），其次为C57BL/6小鼠（13次，13.98%）；造模方法多选用雷公藤制剂造模法（38次，40.86%），其次为环磷酰胺造模法（28次，30.11%）；高频检测指标为阴道脱落细胞学检测（93次，23.97%）、HE染色观察组织病理变化（72次，18.56%）；在含有阳性对照药物的64篇文献中，西药使用频数最多的是雌激素（50次，62.50%），中药以坤泰胶囊（2次，2.50%）用药频数最高。结论 当前卵巢储备功能减退动物模型的建立多采用雷公藤制剂造模法和环磷酰胺造模法，模型动物常选取SD大鼠，能有效地提高实验效率；应综合卵巢组织病理、血清生化指标等多种检测结果进行模型评价。