摘要: 探讨转化生长因子 β超家族肽类的细胞内信号转导分子Smads蛋白在发育不同阶段大鼠睾丸的表达及在精子发生中的作用机理。分别选用出生后 3、 7、 14和 2 8d以及成年大鼠 ,应用蛋白质免疫印迹杂交技术及免疫组织化学ABC法结合葡萄糖氧化酶 DAB 硫酸镍铵增强技术 ,检测Smad 1、Smad 2、Smad 4和Smad 5蛋白在大鼠睾丸的表达、定位和发育变化 ,并通过图像分析技术对免疫组织化学结果进行统计学分析。免疫印迹杂交发现 ,Smad 1、Smad 2和Smad 4在 3、 7、 14和 2 8d以及成年大鼠睾丸均有蛋白质表达 ,Smad 5蛋白则仅表达于 2 8d和成年大鼠睾丸。免疫组织化学结果显示 ,Smad 1在 14d大鼠睾丸的生精细胞中即可见免疫阳性反应 ;Smad 2从 7d起开始表达 ,免疫阳性产物位于各级生精细胞的胞质内 ;Smad 4在发育的各个阶段的间质细胞中均有较强的表达 ;Smad 5仅在 2 8d和成年大鼠的间质细胞中有弱的表达。结果提示 :Smads蛋白在睾丸中的分布不同 ,表达量存在差异 ,为揭示TGF β超家族在精子发生和发育过程中的分子机制提供了直接证据

摘要: 本实验应用垂体细胞体外培养模型 ,观察了米非司酮 (MP)对GnRH、高浓度细胞外K+([K+]e)和蛋白激酶C激活剂PMA诱导的LH分泌的影响。结果证实MP可以剂量和时间依赖方式抑制GnRH诱导的LH分泌 ,并可拮抗P调节GnRH诱导的LH分泌效应。同时发现 10 -7mol/LMP短时间处理 4h能抑制 6 0mmol/LKCl和 10 -8mol/LPMA诱导的LH分泌 ,而 10 -7mol/LP短时间处理则起促进作用。当处理时间延长为 5 2h时 ,P对 6 0mmol/LKCl和 10 -8mol/LPMA诱导的LH分泌无明显作用 ,P也仅对 6 0mmol/LKCl刺激的LH分泌起抑制作用 ,但不影响 10 -8mol/LPMA诱导的LH分泌。当P和MP同时处理时 ,则MP可逆转P对高 [K+]e和PMA诱导的LH分泌的调节作用 ,表明MP影响GnRH诱导的LH分泌的机制可能与MP影响电压依赖性钙离子通道和PKC的活性有关。

摘要: 用免疫组织化学ABC法 ,研究了颌下腺及无血清培养的颌下腺上皮细胞DHEA的定位。结果显示 ,大鼠颌下腺的浆液性腺泡的上皮细胞及各级导管上皮细胞均呈DHEA免疫反应阳性 ,无血清培养腺上皮细胞也呈DHEA免疫反应阳性 ,阳性物质分布于胞质 ,胞核呈阴性反应。此结果提示 :大鼠颌下腺能自身合成DHEA ,DHEA对消化功能可能具有重要的调节作用。

摘要: 本实验用原位杂交法 ,对听源性遗传癫痫易感大鼠 (P77PMC)癫痫发作前、单次癫痫发作和多次发作时大脑颞皮层CCKmRNA阳性信号进行了检测。结果显示 :(1)单次和多次癫痫发作后颞皮层CCKmRNA阳性神经元数量明显增加 (P <0 .0 1) ;(2 )多次癫痫发作者上述脑区CCKmRNA阳性神经元数量较单次癫痫发作有明显的下降 (P <0 .0 1)。大脑颞皮层CCKmRNA增高表明 ,CCKmRNA在癫痫发作过程中起了某种作用 ;多次癫痫发作大鼠CCKmRNA表达降低提示 ,单次和多次癫痫发作时大脑皮层对CCKmRNA转录的调控可能存在不同的机制。

摘要: 为研究促甲状腺激素释放激素 (thyrotrophin releasinghormone ,TRH)及其受体 (TRHreceptor,TRH R)在大鼠睾丸组织中的表达规律和在生殖发育调节中的作用 ,依据大鼠下丘脑中的前TRH原 (preproTRH ,ppTRH)和垂体中的TRH RcDNA设计引物 ,采用RT PCR法从大鼠睾丸组织中获得了 ppTRH和TRH R的cDNA克隆 ,测序后构建表达载体 ,在大肠杆菌中表达了可溶性的ppTRH和TRH R融合蛋白。利用实时动态定量RT PCR (realtimequantitativeRT PCR)法观察了 ppTRH和TRH R在不同发育阶段大鼠睾丸中的表达变化 ,发现在睾丸间质细胞发育的初期阶段 (第 8天 ) ,没有ppTRH和TRH R的表达 ,但从第 15天起能观察到 pp TRH和TRH R的表达 ,并且表达量在 2 0天、 35天、 6 0天和 90天逐渐增加。这些结果表明 :大鼠睾丸组织能特异性表达ppTRH和TRH R ,并且表达量与发育过程相关。ppTRH和TRH R体外表达产物的获得为后续研究其功能奠定了基础。