摘要: 利用Illumina HiSeq~(TM) 2500测序平台,对通过高温胁迫实验筛选得到的20尾耐高温和20尾不耐高温的大黄鱼(Larimichthys crocea)进行了简化基因组测序(SLAF-seq),每个样本的平均测序深度达到10.26×,共获得419211个高质量的群体单核苷酸多态性(SNP)位点。利用TASSEL软件的混合线性模型(MLM)进行全基因组关联分析(GWAS),共筛选到38个与大黄鱼耐高温性状显著相关的SNP位点(P<2.39E–08)。利用BLAST程序定位每个SNP位点在大黄鱼基因组中的位置,并分析其周围的功能基因。结果在38个SNPs附近共找到26个已知的功能基因,这些基因主要与细胞转录、代谢、免疫等功能相关。研究结果可为下一步大黄鱼耐高温分子机制解析及耐高温品种的选育提供参考。

摘要: 为探讨玉米蛋白粉替代鱼粉对大黄鱼(Larimichthys crocea)幼鱼生长、血清生化指标及肝脏组织形态的影响,进行了为期56d的养殖试验,探索玉米蛋白粉替代大黄鱼幼鱼饲料鱼粉的适当比例。以初始体重为(10.49±0.03)g的大黄鱼幼鱼为研究对象,用玉米蛋白粉替代基础饲料(含40%鱼粉)0、15%、30%、45%、60%和75%的鱼粉来配制6种等氮(粗蛋白含量45%)等脂(粗脂肪含量10%)的实验饲料,分别标记为C0、C15、C30、C45、C60、C75组。除C0以外的替代组分别添加了适量的晶体氨基酸(赖氨酸和蛋氨酸)。结果表明,玉米蛋白粉替代水平对大黄鱼幼鱼存活率、试验鱼特定生长率、饲料系数均无显著性差异(P>0.05)。C45和C60组肌肉粗蛋白含量显著高于C0组(P<0.05),肌肉粗脂肪含量C45组显著高于C0、C15和C75组(P<0.05),C45、C60和C75组肌肉水分显著低于C0组(P<0.05),全鱼粗蛋白、粗脂肪、水分含量无显著差异(P>0.05);灰分含量有上升趋势,C75组显著高于其他组(P<0.05)。各替代组的血清白蛋白、白球比、谷草转氨酶、葡萄糖均无显著性差异(P>0.05);随着替代比例的升高,总胆固醇有降低的趋势,除C15组与C0无显著性差异外(P>0.05),4组均显著低于CO组(P<0.05);实验探讨替代后对鱼的影响,C75组血清总蛋白和球蛋白含量显著低于C0组(P<0.05);C75组血清谷草转氨酶含量显著高于C0(P<0.05)。各处理组总抗氧化能力、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化氢酶均没有显著性影响(P>0.05),但替代组总抗氧化能力含量均高于C0;丙二醛在C75组显著高于C0组(P<0.05)。通过肝组织学观察表明,当替代比例高于45%时,呈现肝细胞核偏位、胞浆内脂肪滴较多、细胞透明空泡化等症状。综上所述,在实验条件下,研究认为玉米蛋白粉替代鱼粉对大黄鱼幼鱼的适宜添加量为45%。

摘要: 以初始体重为(137.5±0.4)g的大黄鱼Larimichthys crocea为实验对象,在海水浮式网箱中进行为期8周的摄食生长实验,研究饲料中糖水平对其生长、饲料利用、血液生化指标和糖代谢酶活力等的影响,以确定大黄鱼的饲料糖需求量。实验饲料按等氮(粗蛋白质45%)等能(18 k J/g)设计,糖含量分别为1.75%、6.67%、13.64%、21.15%、26.69%和32.25%。结果表明随着饲料糖水平的升高,大黄鱼特定生长率(SGR)先升高后降低,当糖含量为26.69%时,SGR达最大值,显著高于糖含量为1.75%、6.67%、13.64%和32.25%处理组(P<0.05)。饲料效率(FER)和蛋白质效率(PER)均在糖含量为13.64%—21.15%时显著高于其他处理组(P<0.05)。随饲料中糖水平的升高,全鱼粗脂肪含量显著降低,在糖含量为32.25%时降至最低(10.56%),显著低于其他处理组(P<0.05)。肝体比和肝糖原含量均随饲料糖水平的升高而显著升高(P<0.05),在糖含量为32.25%时达到最大值,显著高于糖含量为1.75%和6.67%处理组(P<0.05)。随饲料糖水平的升高,血浆甘油三酯和胆固醇水平均显著降低(P<0.05),而血糖水平不受饲料糖含量的影响(P>0.05)。大黄鱼血清溶菌酶、脂蛋白脂酶和肝脂酶活性均随饲料糖水平的升高显著降低(P<0.05),而肠淀粉酶活性表现为先升高后降低,在糖含量为26.69%时,酶活力达到最大值。随饲料糖水平的升高,大黄鱼肝脏己糖激酶活性先上升后下降,在糖含量为21.15%时达到最大值,显著高于糖含量为32.25%处理组(P<0.05),而丙酮酸激酶活力在糖水平为32.25%时达到最大值,显著高于糖含量为1.75%和6.67%处理组(P<0.05)。用二次多项回归模型拟合特定生长率和饲料糖水平的关系,得到大黄鱼饲料中最适糖含量为22.7%。

摘要: 研究从生长、健康和营养价值方面评估了高水平的双低菜粕替代饲料鱼粉对大黄鱼潜在的危害。在鱼粉含量60%的基础饲料(FM)上按照质量分数用双低菜粕分别替代15%(CM15)、30%(CM30)、60%(CM60)和100%(CM100)的鱼粉,配制成5种实验饲料。每种饲料投喂5个网箱的大黄鱼[初重(135.38±1.02)g],即每个处理5个重复,进行12周的养殖实验。结果表明,当双低菜粕替代水平在15%和30%时,大黄鱼的生长及饲料系数并没有受到显著性的影响。然而,当替代水平高于30%时,大黄鱼的末重和特定生长率均显著降低,而饲料系数显著升高(P<0.05)。当替代水平达到100%时,大黄鱼摄食率达到最高值而肥满度达到最低值(P<0.05)。在组织形态方面,大黄鱼摄食双低菜粕替代的饲料后肠道绒毛的弯曲程度减少并且排列更加不规则,而肝细胞则呈现出圆形空泡状并伴随着细胞核的偏移。对大黄鱼骨骼进行X-射线扫描发现,摄食双低菜粕的大黄鱼椎体和头部出现了畸形。在营养价值方面,双低菜粕替代鱼粉并未显著影响大黄鱼背肌的脂肪含量、蛋白含量和氨基酸组成,然而脂肪酸组成受到了显著影响,即N-6系列脂肪酸含量显著升高,而DHA与EPA含量显著降低(P<0.05)。根据欧洲食品安全局(EFSA)的相关标准,这些营养价值的变化并没有影响大黄鱼作为健康食品的功能。由此可见,高水平(60%和100%)的双低菜粕替代鱼粉对大黄鱼的负面影响主要表现为降低大黄鱼的生长性能、改变肠道和肝脏组织形态,以及影响大黄鱼的骨骼健康。然而,双低菜粕替代鱼粉养殖大黄鱼的肌肉仍然符合人类的膳食要求。因此,双低菜粕替代鱼粉并没有影响大黄鱼作为食用鱼的营养价值。

摘要: 研究旨在克隆大黄鱼磷脂酰胆碱合成关键基因磷脂酰胆碱胞苷转移酶α(CCTα)基因全长,并检测其表达量随稚鱼生长发育的变化。利用同源克隆技术和RACE技术从大黄鱼肝脏中成功扩增出CCTα的全长。同时应用real-time PCR法检测不同日龄大黄鱼稚鱼CCTα的表达变化。序列分析表明,CCTα全长2419 bp(Gen Bank登录号:KF006239.1),包括273 bp的5'端非编码区,1107 bp的开放阅读框,1010 bp的3'端非编码区,共编码369个氨基酸。系统进化树分析表明,相比其他物种,大黄鱼CCTα基因与红鳍东方鲀的亲缘关系较近。定量结果表明,孵化后,大黄鱼仔稚鱼CCTα的表达量随日龄的变化先显著升高,在15日龄时达到最大值,随后显著下降并趋于平稳,CCTα基因表达量的变化趋势与大黄鱼稚鱼消化系统的发育密切相关。