摘要: 研究证明,海胆、鱼、两栖类胚胎孵化主要是由孵化腺细胞分泌的孵化酶(hatching enzyme, HE)作用的结果。研究HE的意义在于:1.研究孵化腺细胞的分化和溶解卵膜的机理。2.搞清HE的性质将有助于提高水生动物的孵化率。我们在研究中华大蟾蜍孵化腺细胞的形成、分化及结构的基础上进一步对孵化酶进行了分离和提纯。

摘要: 本文以培养的中华大蟾蜍（Ｂｕｆｏｂｕｆｏｇａｒｇａｒｉｚａｎｓ）、花背蟾蜍（Ｂｕｆｏｒａｄｄｅｉ）的外周血淋巴细胞为实验材料，采用ＢｒｄＵ标记法和胸苷标记的方法，获得了中华大蟾蜍与花背蟾蜍清晰的高分辨晚复制带，确定了中华大蟾蜍每一染色体的特征性晚复制区；并就中华大蟾蜍与花背蟾蜍的晚复制带纹进行了精确比较，发现中华大蟾蜍与花背蟾蜍的染色体之间具极高同源性。该结果说明：在相同的培养条件下，只要ＢｒｄＵ掺入Ｓ期的时间较为统一，显示复制带的条件基本一致的情况下，利用复制带研究无尾两栖类不同物种间染色体同源性是完全可行的

摘要: Mest基因是一种印记基因,在人、小鼠以及其他的哺乳动物和有花植物中都有研究报道。为了更好地研究该基因的功能和进化特点,利用RACE法获得了中华大蟾蜍Mest基因(BgMest)的cDNA全长序列(1 325 bp),它包含一个完整的ORF,可编码326个氨基酸的多肽(GenBank登陆号:ABQ10905)。多肽链中包含一个典型的α/β水解酶折叠结构域,其在氨基酸水平上与热带爪蟾和一些哺乳动物分别存在86%和70%～80%的相似性。进化树分析显示Mest基因为单系起源。RT-PCR显示,BgMest基因在精巢、卵巢、肝、肾、脑、胃和肺中都有表达,并且该基因在序列、表达模式以及蛋白产物的高级结构的高度保守性都说明它在两栖类生物中是保守的。但是在对哺乳动物以及一些脊椎动物的印记基因进行进化分析时,发现它们具有不同的起源。

摘要: 为探究中华大蟾蜍（Bufo gargarizans）人工养殖过程中暴发性死亡的原因，本研究对山东某养殖基地患病死亡蟾蜍进行解剖观察，发现疑似线虫感染。将检出的线虫样本进行COI基因和ITS序列扩增比对并结合形态学特征鉴定物种，对患病大蟾蜍组织病理学分析，以确定病因。结果表明，获得的线虫ITS序列（GenBank序列号为PQ669203）与NCBI数据库中日本棒线虫（Rhabdias nipponica）ITS序列（GenBank序列号为AB818377）的相似度为99.65%；获得的线虫COI基因序列（GenBank序列号为PQ669209）与NCBI数据库中日本棒线虫COI基因序列（GenBank序列号为LC671279）的相似度为98.66%。通过普通光学显微镜测量检出线虫样本的各个器官数据，并使用扫描电子显微镜观察检出线虫样本的细微结构，确定检出的线虫为日本棒线虫；组织病理学分析发现，患病蟾蜍肺组织存在钙化灶、组织空泡化和核空泡化。剖检84只患病蟾蜍，检出寄生在蟾蜍肺部线虫283条，线虫感染阳性蟾蜍65只，感染率为77.38%，平均感染强度为4.4条/只。本研究结果提示，日本棒线虫感染是导致本次养殖场中华大蟾蜍大规模死亡的主要病原学因素和重要诱因，观察到的病理损伤支持其具有较强的致病潜力，这将为人工养殖中华大蟾蜍的疾病防控提供数据参考。