摘要: It is inevitable to develop noninvasive sampling methods to do studies on giant panda even diagnose the diseases since which is so endangered that it's impossible to carry out invasive sampling.A non-invasive sampling method to detect the intestinal pathogen, Yersinia enterocolitica in feces of pandas based designing PCR primers was established in this study. The main procedures are based on bacteria enrichment and cell lysis before binding the pathogen DNA to silica powder at high concentration of Kalium iodide and neutral pH conditions. Before PCR cycles, the binded DNA is washed with 80% ethanol and eluted with diluted EDTA buffer. Results showed that the silica-based feces DNA-purification method could remove the inhibitors of PCR so applicable to detect the target pathogen.

摘要: 本文通过PCR技术,直接从大熊猫基因组DNA上克隆得到其神经营养素-4的成熟肽编码序列,通过序列分析发现,该基因在进化上具有较高的保守性。将神经营养素-4成熟肽完整编码序列克隆至pGEX-4T-3表达载体,并经IPTG诱导在大肠杆菌中进行原核生物表达,获得了大熊猫重组蛋白神经营养素-4。重组表达蛋白经纯化后,进行大鼠肾上腺嗜铬瘤细胞神经营养因子的活性鉴定,发现其能够诱导神经细胞分化产生突触,具有预期的生物学活性。对大熊猫神经营养素-4的基因工程研究,为大熊猫癫痫的基因治疗奠定了基础。

摘要: 卧龙和草坡自然保护区以保护大熊猫及其生态系统为主,面积3224km2,为中国大熊猫分布区最大的保护区。自1974年以来,我们经过多次调查,其栖息地由约2500km2缩减到现今约800km2。大熊猫在该地所选择的最适生境在海拔2800～3100m一带的三、四级夷平地带,面积约4×104hm2。大熊猫的种群数量,据1974年调查有195只(其中卧龙为145只),1983年冷箭竹大面积开花后种群有所下降,而上世纪90年代以后有所恢复,现在约有150只。在保护对策上,应在4个隔离种群间退耕还林,控制交通流量和禁止夜间通行,扩大保护范围到毗邻的县,对最适的栖息地实行绝对保护,并控制旅游规模及旅客流量。

摘要: 慢肌肌钙蛋白C(Troponin C type 1,TNNC1)具有高度保守性,调控骨骼肌慢肌和心肌的收缩,影响肌蛋白的生成,从而可能导致动物肌肉的生长、进化和功能的差异。本研究以大熊猫和亚洲黑熊骨骼肌为材料,提取总RNA和基因组DNA,运用RT-PCR和Touch-down PCR分别扩增出TNNC1基因的cDNA序列和结构基因序列,并且构建了含有TNNC1 cDNA的重组表达载体,转化进入E.coli BL21进行超表达研究。结果表明大熊猫TNNC1基因的cDNA片段长602 bp,包含一个编码161个氨基酸的开放阅读框,其结构基因全长2 831 bp,包含6个外显子和5个内含子。亚洲黑熊TNNC1基因的cDNA片段长486 bp,亦包含一个编码161个氨基酸的开放阅读框,其结构基因全长2 758 bp,同样包含6个外显子和5个内含子。该两个物种的TNNC1基因与已报道的13种动物的TNNC1基因具有很高的相似性。拓扑预测表明,大熊猫和亚洲黑熊TNNC1蛋白有1个蛋白激酶C磷酸化位点,5个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点,1个N-豆蔻酰化位点,3个EF手性钙结合域及1个N-糖基化位点。将TNNC1基因在大肠杆菌中表达发现TNNC1蛋白与氮端多聚组氨酸标签蛋白(His6)融合成大小为23.5kD左右的多肽,这与预期结果相一致。本研究结果为进一步深入探讨大熊猫和亚洲黑熊TNNC1基因及蛋白的结构、功能和进化关系提供资料。

摘要: 大熊猫(Aluropoda melanoleuca)是举世瞩目的珍稀濒危动物,被誉为中国的国宝,越来越受到国内外各界人士的喜爱和重视。关于大熊猫的血液生理生化指标资料已有较多报道。Chen(1987)对6只大熊猫,王强等(1998)对18只大熊猫,