摘要: 为确定不同种类夜蛾口器及其感器在超微结构上的差异,采用扫描电子显微镜对棉铃虫Helicoverpa armigera(Hübner)、烟夜蛾H.assulta(Guenée)和银纹夜蛾Argyrogramma agnata(Staudinger)3种鳞翅目(Lepidoptera)夜蛾科(Noctuidae)重要农业害虫雌、雄成虫口器感器的超微形态进行了观察和比较。结果表明:3种夜蛾雌、雄成虫口器感器类型均无明显差异。棉铃虫和烟夜蛾口器感器在类型和形状上十分类似,均具有毛形、锥形和栓锥形感器;喙管末端的栓锥感器粗、密,棱纹明显。银纹夜蛾口器感器与两种铃夜蛾区别明显,除上述3类感器外,还具有腔锥形感器;其喙管末端的栓锥感器细、疏,棱纹不明显。结果显示口器感器可用于夜蛾的分类及亲缘关系研究。

摘要: 为探讨蛾翅数学形态特征(MMC)在夜蛾科分类鉴定中的可行性,本文利用数字化技术获得和处理昆虫图像,对鳞翅目夜蛾科6种夜蛾的右前翅提取矩形度、延长度、叶状性、偏心率、球状性、似圆度和不变矩Hu1、Hu2等13项与大小尺度和方向均无关的数学形态特征,并利用方差分析、逐步判别分析和聚类分析等方法研究了各项数学形态特征在昆虫分类上作为分类特征的可行性、可靠性和重要性,并且从数学形态学角度对夜蛾科6个种的亲缘关系进行了分析。分析结果认为矩形度和延长度2个形态特征对这6种夜蛾的分类鉴定没有显著意义,从而筛选出11个形态特征作为分类变量,它们的作用大小依次为:(偏心率、Hu5、Hu7)>Hu2>似圆度>球状性>Hu3>(叶状性、Hu1、Hu6)>Hu4。利用蛾翅的这些特征参数成功地实现了对夜蛾科6种夜蛾的分类鉴定,基于这些特征参数的6种夜蛾的亲缘关系远近与基于传统形态学的系统进化观点相同。研究表明蛾翅数学形态特征可应用于蛾类昆虫的快速鉴定,为未来逐步实现蛾类昆虫的自动识别奠定了基础。

摘要: 触角结合蛋白(antennal binding proteins,ABPs)是气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)的一个亚类,推测其在昆虫嗅觉中起作用。为了探讨这一问题,本研究通过转录组数据分析并利用RACE技术,克隆了甜菜夜蛾Spodoptera exigua触角结合蛋白Ⅱ基因(SexigABP2)的全长cDNA序列(GenBank登录号为HQ234486)。序列分析表明,该基因开放阅读框长444bp,编码148个氨基酸,具有OBPs典型的6个半胱氨酸位点;其氨基酸序列和烟芽夜蛾Heliothisvirescens的HvirABP2的一致性最高,达72%。实时定量PCR分析显示,该基因主要在触角中表达,在喙、足、翅等组织中也有少量表达,且在雌蛾触角及足中的表达量显著高于雄蛾。进一步对该基因进行原核表达和纯化,利用荧光竞争结合实验测定了SexigABP2对35种气味物质的结合能力,发现其对甜菜夜蛾性信息素组分(Z)-9-十四碳烯醇和植物挥发物法尼醇的结合能力较强,结合常数分别为8.24μmol/L和8.14μmol/L。结合能力比较表明,SexigABP2对不饱和长碳链化合物较饱和短碳链化合物具有更强的结合能力;在不饱和长碳链化合物中,对醇类物质又较乙酸酯类物质具有更强的结合能力。结果提示SexigABP2可能参与了成虫对不饱和长碳链的植物挥发物的感受。

摘要: E75是昆虫蜕皮级联反应中的早期转录因子之一。本研究运用RT-PCR和RACE技术,首次获得了斜纹夜蛾Spodoptera lituraE75D基因,命名为Sli-E75D(GenBank登录号:JQ266225),其开放阅读框全长1836bp,编码611个氨基酸残基,3'非翻译区全长为358bp,同时获得其5'非翻译区共341bp。经核苷酸序列比对分析,E75在鳞翅目昆虫间保守性较高,尤其3'非翻译区具有高保守性,但由于启动子不同,E75异构体mRNA5'端序列存在差异;经氨基酸序列比对,Sli-E75D与棉贪夜蛾Spodoptera littoralis、烟草天蛾Manduca sexta、家蚕Bombyx mori E75D的一致性分别为98.4%,79.3%和76.5%。基于E753'非翻译区的高保守性,利用PITA和RNAhybird程序预测了最有可能调控鳞翅目昆虫E75基因的3种miRNAs:miR-14,miR-33和miR-87。构建pET28a-Sli-E75D表达载体,分别转化BL21(DE3)和Transetta(DE3)菌株,检测大肠杆菌Escherichia coli稀有密码子对E75D原核表达的影响,SDS-PAGE结果显示,转化Transetta(DE3)菌株的pET28a-Sli-E75D可高效表达大小约74.79kD(含预测的67.19kDSli-E75D,7.6kDT7·Tag和His·Tag)的重组蛋白,与其理论分子质量基本吻合,而转化BL21(DE3)菌株的pET28a-Sli-E75D质粒只见微量重组蛋白表达。由于Transetta(DE3)菌株可补充大肠杆菌6种稀有密码子的tRNA,较BL21(DE3)更适合于E75D的外源表达。qPCR检测了斜纹夜蛾从末龄幼虫到成虫发育过程中各时间点Sli-E75的相对表达水平:Sli-E75在6龄幼虫期的表达量较低,从预蛹开始,表达量急剧升高,并在蛹中期达到最高峰,之后迅速下降,但成虫期表达水平又出现回升。这些结果有助于深入研究E75在昆虫蜕皮级联反应中的作用。

摘要: 【目的】同安钮夜蛾Ophiusa disjungens(鳞翅目,夜蛾科)是危害桉树的主要害虫之一。同安钮夜蛾核型多角体病毒(OpdiNPV)是从O.disjungens中分离到的新病毒。本研究主要目的是从分子水平上了解该病毒。【方法】对一条PstⅠ的酶切片段进行了克隆、测序和分析。【结果】在基因数据库中通过对碱基序列的比对,发现了一个Ac108的同源基因,命名为Opdi108(GenBank登录号为EU732666)。该基因的开放阅读框含有225对碱基,其编码蛋白与其他已知杆状病毒同源物有16%37%的氨基酸序列一致性。在起始密码子ATG上游有一个晚期启动子TAAG。C末端含有His-tag的Opdi108基因在大肠杆菌中Escherichiacoli进行了表达,融合蛋白的分子量为28.7kDa。以荧光蛋白EGFP为标记物,构建了Opdi108与EGFP的重组体,利用Bac-to-Bac表达系统实现了与AcMNPV的重组,用该重组病毒vEGFP-Opdi108感染斜纹夜蛾Trichoplusiani细胞。感染24和72h后分别用共聚荧光显微镜观察,发现Opdi108定位在细胞质内。【结论】本研究从分子生物学角度研究OpdiNPV,为进一步利用该病毒防治包括同安钮夜蛾在内的害虫,以及构建重组杀虫剂等奠定基础。