摘要: 利用RT-PCR技术从烟实夜蛾Helicoverpa assulta( Hass)雄虫触角中扩增得到了信息素结合蛋白3( HassPBP3)。克隆和测序结果表明,该基因核苷酸序列全长495 bp,编码164个氨基酸残基,预测分子量18.5 kD。并预测N-末端疏水区包含由22个氨基酸组成的信号肽。因此,成熟蛋白应包括142个氨基酸,预测分子量为16.1 kD,等电点为5.44。经氨基酸序列同源性分析发现,此序列与已知昆虫PBP3有较高的同源性,而且具有气味结合蛋白的典型特征。将该基因重组到表达载体pGEX-4T-2中进行原核表达。经IPTG诱导、SDS-PAGE分析和Western印迹检测,结果表明烟实夜蛾PBP3基因能在大肠杆菌BL21中表达,电泳检测到一条大约42 kD的外源蛋白,与预测的融合蛋白分子量相符。

摘要: 利用RT-PCR技术扩增了编码烟实夜蛾Helicoverpa assulta触角化学感受蛋白(chemosensory protein)的全长cDNA。克隆和测序结果表明,烟实夜蛾化学感受蛋白基因核苷酸序列全长384 bp(GenBank序列号: DQ285667) ,编码127个氨基酸残基,预测N-末端包含16个氨基酸组成的信号肽序列,因此估测其成熟蛋白分子量为12.97 kD,等电点为5.32。将该基因重组到表达载体pGEX-4T2中,并转入原核细胞中进行表达。SDS-PAGE和Western印迹分析表明,经IPTG诱导后,烟实夜蛾化学感受蛋白基因能在大肠杆菌BL21中表达,电泳检测到一条约39 kD的外源蛋白,与预测的融合蛋白分子量大小相符。

摘要: 在(28±1)℃下,以斜纹夜蛾Spodopteralitura为靶标昆虫,测定亚致死剂量的乐斯本、除尽与斜纹夜蛾核型多角体病毒(SlNPV)混用后对幼虫SOD(超氧化物歧化酶)、CAT(过氧化氢酶)和POD(过氧化物酶)活性的影响。结果表明,乐斯本和SlNPV混合悬液处理后斜纹夜蛾体内SOD活性显著高于清水、病毒和乐斯本单独处理组,12 h、24 h和36 h时分别为清水对照的1.18、1.35和1.25倍;除尽和SlNPV混合悬液处理后12 h,其酶活性低于清水、SlNPV和除尽单独处理组。乐斯本和病毒混合悬液处理后,斜纹夜蛾体内CAT活性高于清水、病毒和乐斯本单独处理组,12 h、24 h和36 h时分别为清水对照组的2.79、1.09和1.53倍;除尽和病毒的混合悬液处理后,其酶活性除12 h时明显高于清水对照外,其他时间均低于清水对照。在正常和中毒的斜纹夜蛾体内均未测出POD活性。可见,农药与病毒混合处理主要影响了CAT活性。

摘要: 为了进一步评估斑点野生稻Oryzapunctata的抗虫性,采用液液分配萃取和硅胶柱层析的方法,从斑点野生稻甲醇提取物中分离获得石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和水的萃取物,测定了其对斜纹夜蛾Spodopteralitura3龄幼虫拒食活性。结果显示,氯仿萃取物比其他4种萃取物具有更高的拒食活性,在2.5mgmL的浓度下,24h和48h的拒食率分别为55.62%和52.66%。氯仿萃取物经硅胶柱层析后,得到14个组分。比较14个组分的拒食活性,发现组分4和10为主要的活性组分。这两个组分对斜纹夜蛾幼虫中肠脂肪酶和α淀粉酶的活性都具有一定的抑制活性,其中组分10对脂肪酶具有显著的抑制效果,以1mgmL的浓度活体处理48h和72h抑制率分别达19.82%和34.60%;对α淀粉酶的影响在48h和72h内都具有显著的抑制效果,随着处理时间的延长,其抑制率逐步提高,72h的抑制率分别为25.06%和27.40%。结果提示斜纹夜蛾幼虫中肠脂肪酶和α淀粉酶可能是斑点野生稻拒食活性成分的作用靶标。

摘要: 通过在植食性昆虫斜纹夜蛾SpodopteralituraFabricius幼虫人工饲料中添加不同浓度的Zn2+,测定了连续3代取食含不同Zn2+浓度饲料幼虫的血淋巴中Zn2+含量,并研究了被Zn2+胁迫的斜纹夜蛾幼虫对寄生性天敌双斑侧沟茧蜂MicroplitisbicoloratusChen生存与发育的影响。结果表明,斜纹夜蛾幼虫血淋巴中Zn2+含量随饲料中Zn2+浓度和幼虫取食世代数的增加而增加;Zn2+胁迫斜纹夜蛾幼虫对双斑侧沟茧蜂的寄生率、从寄生到结茧的时间、蛹期长短、成虫羽化率和成虫寿命等都有不同程度的影响,其中以第2代的寄生率和第1代的羽化率受影响最大,均随着Zn2+浓度的增大而降低。因此,寄主饲料中高浓度的Zn2+能通过食物链影响双斑侧沟茧蜂的生存和发育。