摘要: 【目的】本研究旨在探讨蜕皮激素合成通路相关CYP450基因的表达规律，为害虫防治提供潜在的作用靶标。【方法】以家蚕CYP450基因为查询序列，通过同源比对的方法从斜纹夜蛾基因组中鉴定蜕皮激素合成代谢通路中的CYP450基因，并构建其系统进化树；采用qPCR法检测鉴定的CYP450基因在斜纹夜蛾不同发育阶段(6龄幼虫、预蛹和蛹)、这3个发育阶段的不同组织(中肠、表皮和脂肪体)以及4龄幼虫取食不同寄主植物(辣椒、黄瓜、番薯和花生)叶片后5龄幼虫中肠中的表达量，计算4龄幼虫取食不同寄主植物叶片后发育至蛹的历期；应用PITA, miRanda, microTar和RNAhybrid 4种软件，预测调控鉴定的CYP450基因的微小RNA (miRNA)。【结果】鉴定到斜纹夜蛾蜕皮激素合成通路相关的6个直系同源CYP450基因1,1,11, 1和1；系统进化树显示，斜纹夜蛾这6个CYP450基因分别归属于CYP2和线粒体CYP两个亚家族1, 1和1分别在6龄幼虫、预蛹和蛹期具有最高的表达量，并且分别在6龄幼虫中肠、预蛹脂肪体和蛹表皮中表达量最高。相比取食人工饲料的对照组，4龄幼虫取食番薯和花生叶片后斜纹夜蛾4龄幼虫发育至蛹的历期显著延长， 1在5龄幼虫中肠中的表达量显著上调。在1，1,1和1上鉴定出了多种miRNA结合位点。【结论】蜕皮激素合成代谢通路中，1，1和1可能分别在斜纹夜蛾幼虫、预蛹和蛹期起着关键的调控作用，同时也参与宿主植物次生代谢产物的解毒代谢，并且受到miRNA的严密调控。研究结果不仅有助于深入理解昆虫变态发育调控的复杂机制，还为将来的害虫防治提供了潜在的作用靶标，有利于斜纹夜蛾等害虫的可持续治理。

摘要: 【目的】探讨昆虫病原线虫小卷蛾斯氏线虫 All侵染对草地贪夜蛾幼虫天然免疫反应的影响。【方法】借助倒置显微镜观察和鉴定草地贪夜蛾幼虫的血细胞类型，并对小卷蛾斯氏线虫侵染后不同时间的草地贪夜蛾幼虫血细胞总数目进行统计；通过倒置显微镜观察草地贪夜蛾幼虫对侵入的小卷蛾斯氏线虫的包囊反应；利用倒置荧光显微镜观察小卷蛾斯氏线虫侵染后的草地贪夜蛾幼虫血细胞对金黄色葡萄球菌的吞噬活性；检测小卷蛾斯氏线虫侵染后的草地贪夜蛾幼虫血淋巴中酚氧化酶(phenoloxidase, PO)活性、体内抗菌肽基因相对表达水平以及血浆的抗菌活性。【结果】从草地贪夜蛾幼虫体内共发现5种不同类型的血细胞，分别为原血细胞、粒细胞、类绛色细胞、珠血细胞和浆血细胞。注射1 μL侵染期(infective juveniles, IJs)小卷蛾斯氏线虫(3 IJs/μL)后9和12 h，草地贪夜蛾幼虫的血细胞总数目显著增多。草地贪夜蛾幼虫的血细胞不能包囊活的以及冷处死的小卷蛾斯氏线虫，但可以包囊热处死的线虫。活的小卷蛾斯氏线虫会显著抑制草地贪夜蛾幼虫血细胞对金黄色葡萄球菌的吞噬活性，但冷处死和热处死的线虫不能。注射1 μL(3 IJs/μL)小卷蛾斯氏线虫后，草地贪夜蛾幼虫血淋巴PO活性总体呈“下降升高下降”变化趋势；体内抗菌肽基因, 1, 3, 3以及2的表达水平在线虫侵染后12 h时显著上调，24 h时恢复到对照水平或低于对照水平；血淋巴抗菌活性水平在小卷蛾斯氏线虫侵染后12 h时显著升高，24 h时与对照无显著差异。【结论】小卷蛾斯氏线虫在侵入早期会抑制草地贪夜蛾幼虫的天然免疫反应来建立感染；随后草地贪夜蛾的免疫系统会被激活试图抵御小卷蛾斯氏线虫的侵染；后期随着线虫的成功定殖，草地贪夜蛾的免疫系统最终被抑制或破坏。本研究所得结果为进一步揭示线虫草地贪夜蛾的免疫互作机理奠定了基础，也为改善昆虫病原线虫对草地贪夜蛾的防治效果提供了理论依据。

摘要: 【目的】本研究旨在揭示昆虫蜕皮激素信号通路上的关键核受体因子FTZ-F1在斜纹夜蛾响应虫螨腈和辛硫磷胁迫中的作用机制。【方法】使用生物信息学方法鉴定斜纹夜蛾FTZ-F1基因，并进行序列比对及系统发育树构建；将LC浓度辛硫磷和虫螨腈浸叶处理的桑叶分别喂食斜纹夜蛾3龄幼虫，并分别收集取食药叶后1, 12, 24, 36和48 h时存活的幼虫，使用qRT-PCR技术检测幼虫体内1的表达水平；使用RNAi技术沉默1基因，并使用qRT-PCR技术检测注射dsRNA后1的表达水平；将LC浓度虫螨腈和辛硫磷浸叶处理的桑叶分别喂食沉默了1的斜纹夜蛾3龄幼虫，喂食后24和48 h统计斜纹夜蛾幼虫死亡率；选取8个斜纹夜蛾谷胱甘肽S-转移酶(SlGST)基因，使用qRT-PCR技术检测沉默了1基因的斜纹夜蛾幼虫这些基因的表达水平。【结果】斜纹夜蛾1开放阅读框长1 665 bp，编码555个氨基酸，等电点为6.39，理论分子量61.77 kD，SlFTZ-F1具有DNA结合域、FTZ-F1 box及配体结合域；系统发育分析表明，SlFTZ-F1与草地贪夜蛾的SfFTZ-F1聚为一个亚分支。与ddHO处理的对照相比，LC浓度虫螨腈处理后1, 24和36 h以及LC浓度辛硫磷处理后24和36 h，斜纹夜蛾3龄幼虫1的表达量均显著上调。与注射ds的对照组相比，斜纹夜蛾幼虫在注射ds1后48 h 1基因的表达量显著下降；分别将LC浓度虫螨腈和辛硫磷处理的桑叶喂食沉默了1的斜纹夜蛾3龄幼虫，48 h时与对照组相比斜纹夜蛾幼虫死亡率分别显著升高22%和28%；沉默1的斜纹夜蛾幼虫8个基因的表达量均显著下降。【结论】虫螨腈及辛硫磷显著诱导斜纹夜蛾幼虫1基因表达，沉默1后斜纹夜蛾幼虫对虫螨腈和辛硫磷的敏感性显著升高，解毒酶SlGST基因的表达受到显著抑制，说明发育相关的转录因子FTZ-F1在斜纹夜蛾响应常用杀虫剂胁迫中发挥了重要作用。

摘要: 【目的】几丁质酶和几丁质合成酶对昆虫的变态发育极其重要。本研究旨在阐明苦瓜素Ⅰ对斜纹夜蛾几丁质酶和几丁质合成酶基因表达及其生长发育的影响。【方法】利用RT-qPCR检测斜纹夜蛾几丁质酶基因()和几丁质合成酶基因()在斜纹夜蛾不同发育阶段(卵、幼虫、预蛹、蛹和成虫)和4-6龄幼虫不同组织(体壁、中肠、脂肪体、血细胞、头部和马氏管)中的表达水平以及注射苦瓜素Ⅰ溶液(4 μg/头) 24, 48和72 h时斜纹夜蛾SlCht和SlCHS-A在6龄幼虫各组织中的表达水平。分析在斜纹夜蛾4龄幼虫中注射不同浓度(31.25, 62.5, 125, 250和500 ng/头)的苦瓜素Ⅰ溶液对幼虫和蛹历期、幼虫增重、蛹重、蛹长度、化蛹率、羽化率和存活率的影响，并利用体视显微镜观察斜纹夜蛾幼虫的表型变化。【结果】和在斜纹夜蛾中的表达具有发育阶段特异性。和在卵期表达量最高，幼虫期和预蛹期的表达量较低；在各幼虫期又表现为6龄幼虫期表达量最高，在其他龄期的表达量低。和在斜纹夜蛾6龄幼虫中也显示出组织特异性表达，在血细胞和体壁中高表达，在头部、中肠和脂肪体中低表达。在斜纹夜蛾6龄幼虫中注射苦瓜素Ⅰ能诱导和在其各组织中表达量降低；在4龄幼虫中注射苦瓜素Ⅰ后，斜纹夜蛾的生长发育受到抑制，幼虫增重延缓，发育历期延长，化蛹率下降甚至化蛹失败，幼虫及蛹出现较高的畸形率。【结论】苦瓜素Ⅰ可通过诱导和表达量的降低来实现对斜纹夜蛾生长发育的抑制作用。本研究为进一步阐明苦瓜素对斜纹夜蛾生长发育的抑制机制提供了新的理论基础，并为进一步应用苦瓜素Ⅰ进行防控奠定了基础。

摘要: 【目的】本研究旨在利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，探索甜菜夜蛾谷氨酸门控氯离子通道(glutamategated chloride channels, GluCls)基因不同转录变异体编码的SeGluCls对杀虫剂敏感性是否存在差异。【方法】采用RT-PCR和RACE技术获得甜菜夜蛾的全长cDNA序列，并对其进行生物信息学分析；利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除两个剪接变异体和，并构建甜菜夜蛾敲除品系(3a-KO和3b-KO)，生物测定甜菜夜蛾敏感品系WH-S(对照品系)及3a-KO和3b-KO品系的3龄幼虫对阿维菌素、甲维盐和氟虫腈3种杀虫剂敏感性的差异。【结果】获得了甜菜夜蛾SeGluCl全长cDNA序列，并发现其2种剪接变异体(和), (GenBank登录号: OM304353)的开放阅读框(open reading frame, ORF)长1 362 bp，编码454个氨基酸, (GenBank登录号: OM304354)的ORF长1 365 bp，编码455个氨基酸。两种剪接变异体和编码的SeGluCls都包含4个跨膜区和1个半胱氨酸环。系统发育分析表明，SeGluCl与斜纹夜蛾和草地贪夜蛾的GluCl亲缘关系最近。与对照品系WH-S相比，3a-KO和3b-KO敲除品系对阿维菌素、甲维盐和氟虫腈的敏感性无显著差异。【结论】甜菜夜蛾SeGluCl剪接变异体和编码的SeGluCls对阿维菌素、甲维盐和氟虫腈这3种杀虫剂的敏感性无差异。