摘要: 应用PCR技术从白纹伊蚊和埃及伊蚊基因组中扩增出defensinA基因 ,并与文献报道的defensinA的5个型的cDNA序列进行同源性比较 ,发现此两序列中存在内元 ;从埃及伊蚊体内扩增的片段为蚊虫defen sinAl的前体AaDefAl;从白纹伊蚊体内扩增的片段为defensinA的 1个新型 ,命名为DefA6。

摘要: 唾液腺激肽是埃及伊蚊唾液中的舒血管物质 ,不仅在蚊虫吸血过程中有重要作用 ,还可能具有调节宿主细胞免疫的功能。本研究用PCR方法从基因组DNA扩增出唾液腺激肽的基因并进行了克隆测序 ,发现与报道的埃及伊蚊相应基因序列有几个碱基的差异 ,同源性 97 8% ,但成熟肽部分序列未发现差异 ,这一部分基因序列人工合成克隆入硫氧还蛋白融合表达载体进行了融合表达 ,为进一步的研究打下基础

摘要: 昆虫可通过体内肽聚糖识别蛋白识别外来微生物的肽聚糖而启动免疫机制，从而降低微生物对昆虫自身的影响，但关于蚊虫的相关报道较少。为了解埃及伊蚊的肽聚糖识别蛋白特性，本研究通过分子克隆技术，成功克隆并测序获得了埃及伊蚊肽聚糖识别蛋白AePGRP-S2的ORF序列。该ORF序列有510个碱基，可编码170个氨基酸。生信分析发现其具有典型的PGRP超家族保守结构域与酰胺酶结构域，表明该基因序列很有可能为埃及伊蚊的肽聚糖识别蛋白基因，且可能具有直接的抗菌活性。通过系统进化树分析，发现埃及伊蚊PGRP-S2与埃及伊蚊的PGRP-S的亲缘关系最近；为进一步获得埃及伊蚊肽聚糖识别蛋白AePGRP-S2,本研究构建表达载体，并将靶基因原核表达于大肠杆菌BL21(DE3)中，通过SDS-PAGE及Western Blot的检测，获得46 kDa目的蛋白，为进一步深入了解埃及伊蚊体内肽聚糖识别蛋白PGRP的功能及作用机制奠定基础。

摘要: 埃及伊蚊Aedes aegypti是登革病毒的主要传播媒介，埃及伊蚊感染登革Ⅱ型病毒(dengue virus typeⅡ, DENV2)后产生先天免疫反应的相关研究，有助于进一步理解埃及伊蚊感染DENV2的过程和机制。本研究通过埃及伊蚊和Aag2细胞感染DENV2进行转录组分析，与未染毒的蚊虫和细胞进行对比，筛选出12个表达变化较大的基因，之后分别构建含有这12个基因的PSL1180polyUBdsRED质粒载体，并使用细胞转染技术在Aag2细胞中建立目标基因的瞬时转染过表达模型，观察了目标基因过表达后细胞上清中DENV2的复制水平。结果显示，12个基因中羟基类固醇脱氢酶样蛋白、蜕皮激素20单加氧酶、3β-羟基类固醇脱氢酶3个基因过表达后细胞上清中病毒拷贝数出现了具有统计学意义的降低，表明这3个基因的表达可能影响DENV2在Aag2细胞中的复制。这3个基因的相关蛋白都涉及到20-羟基脱皮酮的合成，这提示20-羟基脱皮酮可能在蚊虫感染DENV2时介导了重要的免疫调节途径，为进一步研究蚊虫与虫媒病毒的互作机制提供了新的思路。

摘要: 本研究通过高通量测序技术检测了寨卡病毒(ZIKV)感染组、血餐对照组和糖水对照组埃及伊蚊中肠组织小RNA的丰度，并筛选出差异表达的6个黄病毒NIRVS和9个棒状病毒NIRVS。针对筛选出的6个NIRVS设计引物用两步法逆转录荧光定量PCR(RT-qPCR)方法验证了ZIKV感染第4、7和10天中肠组织中黄病毒NIRVS片段的表达。结果显示，黄病毒NIRVS AeFlavi53在感染第4、7天均上调，结果与小RNA测序一致，AeFlavi34B和AeFlavi4A在感染第4天上调，第10天下调，但在第7天表达无变化，与小RNA测序结果不一致，其余片段表达量在感染组与对照组间无统计学差异。RT-qPCR与高通量测序的结果一致性差，其原因可能是因为细胞中长链piRNA前体受上游转录和下游酶切多个程序的调节，针对其设计引物进行定量检测的结果不稳定。