摘要: 嗜肺军团菌是一种生活在人工水环境中的条件性致病菌,环境条件对该菌的存活和胞内增殖具有重要的影响.本文用作者建立的军团菌-四膜虫模型,研究了空调水池水、Fe3+和感染温度3种关键性环境因子对嗜肺军团菌在嗜热四膜虫宿主细胞内增殖的影响.结果发现,尽管空调水中Fe3+浓度大大低于培养基中的Fe3+浓度,但适合嗜肺军团菌在嗜热四膜虫宿主胞内的存活和增殖;感染缓冲液中的Fe3+能够被嗜热四膜虫富集,并被胞内的军团菌加以利用,缓冲液中浓度0.05×10-6的Fe3+即可显著促进胞内军团菌的增殖,但0.1×10-6和0.5×10-6的Fe3+促进军团菌胞内增殖的效果差异不显著;较高的温度对军团菌的胞内增殖也有明显促进作用,35℃时,即使感染复数等于10,军团菌也可进行胞内复制扩增,并最终裂解宿主细胞.图7表1参17

摘要: 嗜肺军团菌是一种广泛分布于淡水生态环境中的条件性胞内致病菌,其不同的分化形态与菌体的存活、感染力和毒力有密切关系.本文对不同分化形态的表达绿色荧光蛋白的嗜肺军团菌在不同感染复数(multiplicityofinfec-tion,MOI)下感染嗜热四膜虫BF1株的条件以及胞内增殖的特征进行了研究.结果表明,胞内的军团菌比大肠杆菌有更强的抗消化能力,30℃时处于对数生长期的嗜肺军团菌即使在MOI等于100的情况下仍然在24h内被四膜虫消化殆尽,而平板培养至稳定期的菌体即使MOI只有50即可实现胞内增殖,并在18h内使宿主数量急剧下降.饲喂军团菌后,四膜虫都有一个数量先上升的过程,然后依MOI的不同呈现稳定或下降的趋势.本文还通过荧光显微镜观察描述了一定MOI下四膜虫对稳定期菌体的消化和形态变化的动态过程.图7参14

摘要: 针对环境激素类污染物滴滴涕(DDT)危害大和分子机理复杂等问题,以之前筛选出的一个DDT暴露下差异表达的基因——酮戊二酸/苹果酸载体蛋白基因(2-oxoglutarate/malate carrier,omc)为研究对象,克隆得到该基因转录mRNA的全长为1060bp,其中5′、3′非翻译区分别为46bp和99bp;实时定量PCR方法测定不同浓度DDT暴露下该基因的表达水平下降了20%～50%.四膜虫omc基因上游数个AP-1和NF-kappaB位点的存在,提示该基因表达受DDT调控的模式可能是与高等动物类似的雌激素受体间接调控途径;同时根据omc基因存在多个与三羧酸循环和电子传递链相关的共表达基因的结果推测,DDT可能通过调控omc等基因来影响线粒体正常功能,进而对细胞产生毒害作用.图3表1参28

摘要: 平菇Pleurotus ostreatus（一种人工栽培的食用真菌）的水提取液作为长期维持梨形四膜虫Tetrahymena pyriformis种源的培养液。在这种培养液中接入对数生长的四膜虫,并在它的上面复盖一层液体石腊油,置室温（温度变化范围为8—30℃）下维持达到一年以上。 用这种方法维持一年后的四膜虫,细胞大小和细胞大核直径都要比在丰富有机培养基中正常生长的对数期细胞要小一些,除外,没有其它明显的形态变化。 用这种方法维持一年后的四膜虫,只需经过一次转接到丰富有机培养基中,其细胞大小、细胞大核直径就能恢复到正常情况,但是转接后发现有较长的停滞期。

摘要: 目前国际上的着丝粒蛋白研究工作几乎全是以酵母和高等生物为材料进行的。为了从起源与进化的角度考察着丝粒蛋白，我们以人喉癌培养细胞ＨｅｐⅡ作为对照材料，以两种ＡＣＡ血清和ＣＥＮＰ－Ｂ单抗、多抗以及ＣＨＯ动粒蛋白单抗为探针，用间接免疫荧光和免疫印迹技术对嗜热四膜虫（Ｔｅｔｒａｈｙｍｅｎａｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌａ）作检查。免疫荧光结果表明，ＨｅｐⅡ细胞的着丝粒抗原在间期核中呈点状分布：与ＨｅｐⅡ细胞的不同，嗜热四膜虫的着丝粒抗原在问期核中的分布呈不规则的斑块状。免疫印迹结果表明，作为单细胞生物的纤毛虫虽然在进化上距离哺乳动物和人甚远，但却已具备了与哺乳动物和人的相似的着丝粒／动粒点抗原蛋白。这说明着丝粒和动粒的蛋白组分可能是发生得很早的，而且是相当保守的。