摘要: 以上海四膜虫S1 和嗜热四膜虫BF株和BT株为材料 ,结合显微观察 ,采用生化抽提、SDS -PAGE电泳、扫描及数据统计 ,分析与测定了三个不同株四膜虫对数生长期皮层骨架蛋白组分与含量 ,结果显示嗜热四膜虫的BF与BT株差异较小 ,两者与上海四膜虫S1 株差异则较大 ,S1 株细胞中有 92KD、72KD、66KD、32KD、2 7KD ,而BF和BT株细胞中没有 ,估计这些蛋白的不同与种间亲缘关系及株系、培养条件等有着密不可分的联系

摘要: 为了分析嗜热四膜虫两类金属硫蛋白之间的关系,研究分别构建了MTT1-MTT3和MTT2-MTT4的基因敲除载体,通过同源重组获得敲除大核MTT1-MTT3和MTT2-MTT4的两种嗜热四膜虫突变体细胞株△MTT1-MTT3和△MTT2-MTT4。两种突变体细胞株暴露在Cd2+、Cu2+和H2O2的生长表现出显著不同,△MTT1-MTT3突变体细胞对Cd2+的耐受性显著下降,而△MTT2-MTT4突变体细胞对Cu2+和H2O2的耐受性均显著下降。实时荧光定量PCR分析不同突变体中其他MTT基因的表达变化,在△MTT2-MTT4突变体细胞株中,MTT5的表达水平下调,在500μmol/L Cu2+处理后,△MTT2-MTT4突变体细胞中MTT1、MTT3和MTT5表达相对野生型分别上调6.1、9.5和8.5倍。在△MTT1-MTT3突变体细胞中,MTT2、MTT4和MTT5的表达水平下调,当5μmol/L Cd2+处理后,△MTT1-MTT3突变体细胞株MTT5表达水平相对野生型上调2.9倍,而MTT2和MTT4表达水平相对野生型分别下降了4.9倍和2.5倍。结果表明嗜热四膜虫中的金属硫蛋白MTT1、MTT3和MTT5主要参与细胞的重金属解毒功能;而MTT2和MTT4主要参与细胞内正常的新陈代谢功能,不同的金属硫蛋白基因之间的表达存在相互调控和功能补偿。

摘要: 以嗜热四膜虫(Tetrahymena thermophila)为试验对象,双氢青蒿素(Dihydroartemisinin, DHA)以终浓度为0(对照组)、40、80、160和320μmol/L分别加入到嗜热四膜虫细胞培养液中,探讨双氢青蒿素对嗜热四膜虫的毒性作用。采用CCK-8法检测嗜热四膜虫细胞增殖,倒置显微镜和荧光显微镜观察细胞的形态结构及运动,采用流式细胞术检测线粒体膜电位,检测细胞内抗氧化还原酶活力和线粒体酶活力。结果表明, DHA显著抑制嗜热四膜虫增殖(P<0.05),在一定暴露时间内增殖活力和浓度呈负相关。双氢青蒿素作用嗜热四膜虫48h后各暴露组细胞皱缩变圆,对照组细胞呈椭圆状。其中在160和320μmol/L DHA暴露下,嗜热四膜虫在培养基中的活动减弱,细胞核出现固缩和浓染等特征,线粒体膜电位显著下降(P<0.05)。随着DHA浓度增加,细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性先增强后下降。线粒体内琥珀酸脱氢酶(SDH)活性逐渐降低,与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。上述结果表明,双氢青蒿素对嗜热四膜虫具有毒性作用,抗氧化酶在一定程度上能抵抗双氢青蒿素暴露导致的氧化损伤。氧化应激和线粒体损伤可能是双氢青蒿素对嗜热四膜虫产生毒性效应的重要机制。

摘要: 利用微量热法研究Cd2 + 和Cu2 + 对嗜热四膜虫BF5(TetrahymenathermophilaBF5)生长代谢毒性效应 ,结果表明 :①低浓度的Cd2 + (0～ 0 .4mgL-1)和Cu2 + (0～ 10mgL-1)对四膜虫的生长有促进作用 ,而高浓度的Cd2 + (0 .8～ 3.2mgL-1)和Cu2 + (2 0～ 2 0 0mgL-1)则产生抑制作用 ;②Cd2 + 和Cu2 + 的半抑制浓度IC50 分别为 2 .0 4mg/L和15 5 .5mg/L ;③联合毒性为协同作用 ;④微量热法所得Cd2 + 和Cu2 + 单独作用时的IC10 分别为 0 .96mg/L和 19.9mg/L ,高于种类损伤法结果 ;⑤微量热法所得Cd2 + 和Cu2 + 单独作用时的IC10 均高于II级饮用水水质标准 .而Cd2 + 和Cu2 +间的协同作用使Cd2 + 的IC10 降低为 0 .31mg/L ,高于水质标准 ;Cu2 + 的IC10 降低为 1.16mg/L ,与水质标准相近 .总之 ,微量热法不仅是一种快速评价污染物毒性效应的新方法 ,而且可用于相关的环境毒理学理论研究 .图 1表 5参 16

摘要: 嗜肺军团菌是一种生活在人工水环境中的条件性致病菌,环境条件对该菌的存活和胞内增殖具有重要的影响.本文用作者建立的军团菌-四膜虫模型,研究了空调水池水、Fe3+和感染温度3种关键性环境因子对嗜肺军团菌在嗜热四膜虫宿主细胞内增殖的影响.结果发现,尽管空调水中Fe3+浓度大大低于培养基中的Fe3+浓度,但适合嗜肺军团菌在嗜热四膜虫宿主胞内的存活和增殖;感染缓冲液中的Fe3+能够被嗜热四膜虫富集,并被胞内的军团菌加以利用,缓冲液中浓度0.05×10-6的Fe3+即可显著促进胞内军团菌的增殖,但0.1×10-6和0.5×10-6的Fe3+促进军团菌胞内增殖的效果差异不显著;较高的温度对军团菌的胞内增殖也有明显促进作用,35℃时,即使感染复数等于10,军团菌也可进行胞内复制扩增,并最终裂解宿主细胞.图7表1参17