摘要: 为了确定引起广东环尾狐猴(Lemur catta)呼吸困难、厌食和出血性肺炎症状的病原,从2只死亡的环尾狐猴体内无菌采集心肝肺肾组织样本。通过病原形态学观察,鉴定为弓形虫(Toxoplasma sp.)后,另外采集在狐猴笼舍出现的2只老鼠和1只猫4份组织样本。所有样本分别采用荧光定量PCR及一步法PCR技术进行弓形虫的检测与529 bp重复序列分析。以弓形虫B1基因片断为扩增对象的荧光定量PCR检测显示6份样本的CT为25.84～30.29,溶解曲线中均出现明显峰值,核酸定量峰值均大于阳性对照。用一步法PCR自6份样本中均扩增出529 bp目的片段,测序和Blast分析显示,该目的片段与GenBank中登录号为KC607824和DQ779189的刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)核苷酸序列相似性最高,均为98.7%;与国际标准强毒虫株RH的核苷酸相似性为98.5%。这些结果表明,荧光定量PCR技术可以用于环尾狐猴弓形虫病的快速诊断,本次环尾狐猴的死亡可能是由于弓形虫的感染引起的,刚地弓形虫可能由野猫与老鼠传播。

摘要: 为调查和了解上海动物园园区内动物的弓形虫(Toxoplasma gondii)感染情况,防范园区野生动物弓形虫病,采用Real-time PCR法和ELISA方法分别对采集自园区内流浪猫的103份全血样本和95份血清样本开展弓形虫核酸和血清抗体检测。结果表明,103份全血样本中均未检出弓形虫抗原。95份血清样本中,检出弓形虫Ig G抗体49份,总体阳性率51.6%,阳性率最高区域为灵长动物区(83.3%),最低为两栖爬行类区与兽医院(40.0%),不同区域、不同月份间流浪猫血清抗体S/P值差异未达显著水平。结果提示,园区内流浪猫弓形虫抗体阳性率较高,易感圈养动物的暴露风险较大,在饲养管理中应当引起重视。

摘要: 目的 建立实验用犬人工感染人源强毒力型弓形虫的发病模型。方法 将3只76日龄人工哺乳、正压隔离器内生长的实验用比格犬腹腔注射1.5×10～7个RH株速殖子，每日2次检测直肠体温、采集口腔拭子、直肠拭子，感染8 d后(8 dpi)安乐死所有动物。利用PCR检测拭子和血液中的弓形虫B1基因，利用荧光定量法检测8 dpi犬主要组织脏器中弓形虫529 bp重复片段的拷贝数，并对主要脏器进行组织病理学检测。结果 结果表明3只实验犬在4～5 dpi均出现了一过性体温升高，轻微腹泻；2～6 dpi的咽拭子或肛拭子中能检测到弓形虫B1基因的核酸，且肛拭子阳性率高于咽拭子；8 dpi剖检后，均产生较多腹水；肝组织均出现明显的炎性变化；盲肠和肝中的弓形虫529 bp片段的核酸拷贝数最高。结论 利用SPF级比格犬腹腔接种弓形虫RH株，主要引起一过性体温升高和短时腹泻，可导致肝组织变性和坏死，发病模型较温和。