摘要: 弓形虫子孢子表面抗原(SporoSAG)和棒状体蛋白5(ROP5)是不同阶段虫体表面的特异性抗原，与弓形虫分化及入侵宿主细胞密切相关。本研究表达并纯化重组蛋白rSporoSAG与rROP5,将重组蛋白通过单独、联合等不同方式分别免疫Balb/c小鼠，检测小鼠体液和细胞免疫水平。结果显示rSporoSAG和rROP5成功表达，大小分别约为49.4和38.2 kDa。小鼠免疫实验中，rSporoSAG组、rROP5组、rSporoSAG+rROP5组、初次免疫rSporoSAG二次免疫rROP5组总IgG、IgG1、IgG2a水平与对照组相比显著升高(P<0.05),其中，初次免疫rSporoSAG二次免疫rROP5组的总IgG和IgG2a水平最高。细胞因子检测显示初次免疫rSporoSAG二次免疫rROP5组IL-2水平与对照组相比具有显著性差异(P<0.05),其他组IL-2水平与对照组相比无显著差异(P>0.05)。各实验组IL-4、IFN-γ水平与对照组相比无显著差异(P>0.05)。淋巴细胞增殖实验结果显示各实验组与对照组间均无显著差异(P>0.05)。结果表明，本实验成功表达rSporoSAG、rROP5。rSporoSAG、rROP5单独或联合等免疫Balb/c小鼠能够诱导其产生高水平的体液免疫，但不能有效激活细胞免疫应答，仅初次免疫rSporoSAG二次免疫rROP5组IL-2水平与对照组具有显著性差异，提示先免疫rSporoSAG再免疫rROP5蛋白的免疫策略与其他免疫策略相比是一种更有效的方法，可用于预防弓形虫卵囊感染的研究。

摘要: 目的研究刚地弓形虫RH株对体外培养的孕期小鼠胎盘滋养层细胞周期的影响及相关机制。方法制备小鼠胎盘滋养层细胞并分别接种于不同细胞培养皿,对照组加入DMEM高糖培养基孵育,实验组加入相同体积不同数量(2×104/mL、4×104/mL、8×104/mL)弓形虫速殖子培养6h、12h、24h;以MTT法检测滋养细胞增殖率;流式细胞仪检测细胞周期;Western印迹法检测细胞周期相关蛋白cyclinA、cdk2表达或活性。结果 MTT法检测结果显示刚地弓形虫RH株抑制滋养层细胞增殖,且呈时间剂量依赖性;流式细胞仪检测24h感染组细胞周期在S期产生阻滞,8×104/mL数量组S期细胞比例高达68.73%±1.76%;Western印迹方法分析感染弓形虫组滋养层细胞的cyclinA、cdk2蛋白表达量较对照组明显下降(P<0.05)。结论刚地弓形虫RH株能够抑制小鼠胎盘滋养层细胞增殖并通过调节cyclinA、cdk2等蛋白表达或活性改变引起细胞S期阻滞。

摘要: 目的 :构建弓形虫棒状体蛋白 (ROP2 )基因重组质粒并在大肠杆菌中表达 ,用于筛选弓形虫新的诊断抗原和疫苗分子。方法 :根据ROP2基因已知序列 ,设计合成一对引物 ,用PCR方法从弓形虫RH株基因组DNA中扩增出ROP2基因片段 ,再克隆到pGEX 4T 1质粒 ,重组质粒经酶切及PCR鉴定 ,而后进行测序 ;重组质粒在大肠杆菌BL2 1 (DE3)中进行ITPG诱导表达 ,表达产物经SDS PAGE及WesternBlot分析。结果 :ROP2基因PCR产物大小与预期相符 ,约 1 0 4 3bp ,重组质粒经酶切及PCR鉴定表明获得正确重组子 ,测序结果与已知序列基本吻合 ;SDS PAGE及免疫印迹显示ROP2融合蛋白表观分子量约为 5 5kDa ,表达产物约占菌体总蛋白1 7% ,具有一定的免疫反应性。结论 :克隆并表达了弓形虫ROP2基因 ,为下一步弓形虫诊断及疫苗研究奠定了基础

摘要: 为了调查目前深圳地区人群弓形虫感染情况 ,本文自 1997年至 1999年采用酶联免疫吸附试验( ELISA)对深圳地区不同人群 12 2 0份血清进行检查 ,结果总人群 Ig G阳性率为 11.15% ,Ig M阳性率为0 .2 5%。其中 ,幼儿组、青少年组、成年组、老年组 Ig G阳性率分别为 2 .33%、 5.68%、 8.90 %、 10 .2 3% ;动物饲养员、屠宰工人的阳性率为 2 3.57%、 2 5.0 0 % ,与阳性率分别为 14 .66%、 7.14 %、 6.32 %、 5.68%的饮食业人员、目前没有与动物接触职业者、医务工作者、中学生之间有显著性差异 ( P<0 .0 0 5) ;男性 Ig G阳性率为 11.73% ,与 Ig G阳性率为 10 .66%的女性比较无差异 ( P>0 .5)。结果显示深圳地区人群感染率有随年龄递增而升高趋势 ,且不同职业之间亦有显著差异性 ,但性别差异无显著性。

摘要: 一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）为活化巨噬细胞（ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ，ＭΦ）抑制细胞内弓形虫速殖子增殖的主要效应分子。本文以亚硝基铁氰化钠［ｓｏｄｉｎｍｎｉｔｒｏｐｒｕｓｓｉｄｅ，ＳＮＰ］作为外源性ＮＯ来源探讨其对弓形虫速殖子感染巨噬细胞的作用。结果表明：（１）体外ＳＮＰ的处理，明显抑制了弓形虫速殖子的活力，且经ＳＮＰ预处理的速殖子对ＭΦ的感染力及其侵入细胞后的增殖能力均明显降低，ＳＮＰ的这种抑制作用呈剂量和时间依赖性，并可被肌红蛋白（ＮＯ的清除剂）所逆转；（２）ＳＮＰ可明显抑制ＭΦ内弓形虫速殖子的增殖，并亦呈剂量和时间依赖性，硫酸亚铁、肌红蛋白、Ｌ－半胱氨酸和硫酸亚铁可逆转之。这些结果证明，ＳＮＰ对细胞内和细胞外的弓形虫速殖子的增殖力和活力均具有抑制或杀伤作用。