摘要: 【目的】利用计算机模拟技术,对冈比亚按蚊Anopheles gambiae犬尿氨酸甲酰胺酶(kynurenine formamidase,KFase)的潜在抑制剂进行虚拟筛选,以获得可以削弱冈比亚按蚊作为中间宿主传播疟疾等蚊媒疾病的候选杀蚊剂。【方法】下载冈比亚按蚊KFase的氨基酸序列,通过BLAST方法查询不同物种中的同源蛋白质,并利用MEGA6最大似然法(maximum likelihood method)构建进化树,选择适于作为模板的同源蛋白黑腹果蝇Drosophila melanogaster KFase晶体结构(PDB ID:4E14),对冈比亚按蚊KFase进行三维建模。利用随机森林算法对小分子化合物数据库进行筛选,并对筛选结果进行处理,模拟自然条件下有机小分子与冈比亚按蚊KFase的结合以及分子对接,从而筛选出冈比亚按蚊KFase的潜在抑制剂。【结果】获得3个小分子化合物与冈比亚按蚊KFase结合的亲和能较低,分别是:N-(2,4-diketo-1H-pyrimidin-6-yl)-2-fluoro-benzamide;3-(4-fluorophenyl)-2,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahydropyrimidine-5-carboxylic acid;N-(2-oxo-2,3-dihydro-1Himidazo[4,5-b]pyridin-5-yl)-succinamic acid。它们与冈比亚按蚊KFase结合的亲和能分别为:-9.0,-8.7和-8.9 kcal/mol。【结论】N-(2,4-diketo-1H-pyrimidin-6-yl)-2-fluoro-benzamide,N-(2-oxo-2,3-dihydro-1H-imidazo[4,5-b]pyridin-5-yl)-succinamic acid和3-(4-fluorophenyl)-2,4-dioxo-1,2,3,4-tetrahydropyrimidine-5-carboxylic acid是冈比亚按蚊犬尿氨酸甲酰胺酶的潜在竞争性抑制剂,这些化合物是否可作为杀蚊剂的候选化合物有待实验验证。

摘要: 【目的】doublesex是控制昆虫性别分化的关键基因,决定了昆虫体细胞与生殖细胞的性别。本研究旨在克隆、鉴定重要疟疾媒介冈比亚按蚊Anopheles gambiae性别决定基因doublesex(Angdsx),分析其在雌雄个体内的剪切体及在不同发育时期的表达模式。【方法】基于冈比亚按蚊转录组数据库,比对到Angdsx相关片段,分别以雌雄成蚊c DNA为模板,采用RT-PCR与RACE方法克隆分别获得雌雄个体内Angdsx全长基因,利用生物信息软件对所得序列进行结构域预测、氨基酸序列比对和进化树分析。根据Angdsx特异性表达引物,利用RT-PCR方法研究其在冈比亚按蚊雌雄个体及不同发育时期的表达谱。【结果】分别从冈比亚按蚊雌雄成虫中克隆获得Angdsx c DNA全长序列,分别命名为AngdsxF(Gen Bank登录号:KM978937)和AngdsxM(Gen Bank登录号:KM978938)。Angdsx位于2号常染色体右臂,基因横跨接近80 kb基因组长度。AngdsxF长度为4 874 nt,编码长度为265个氨基酸的雌性特异性蛋白DSXF;AngdsxM长度为3 183 nt,编码长度为633个氨基酸的雄性特异性蛋白DSXM。结构域分析发现Angdsx包括doublesex保守的TRA/TRA-2结合位点、dsx重复序列、富含精氨酸/丝氨酸双肽区、多聚嘌呤增强子序列和RNA结合蛋白结合序列,以及连续的双核苷酸GT为主的重复序列。与AngdsxF相比,AngdsxM具有一个雌性特异性的外显子。AngdsxM在0-2 h卵中高表达,随后逐渐减少,在12-24 h卵中降至最低,之后再次升高;AngdsxF则在6-8 h卵中开始表达。【结论】本研究获得了冈比亚按蚊性别决定基因Angdsx在雌雄个体内的全长序列,Angdsx具有保守的结构域与表达特征。本研究结果为蚊虫性别分化的分子机制及将其最终应用于显性致死昆虫施放技术进行蚊媒的防制提供了理论基础。

摘要: 疟蚊主要依靠嗅觉发现寄主。非洲疟蚊冈比亚按蚊Anophelesgambiae是一种嗜吸人血的疟疾传播媒介昆虫。该文作者基于其全基因组序列 ,采用RT PCR和标准分子克隆技术获得 2个嗅觉结合蛋白候选基因agLZ3788和agLZ9988。测序分析结果表明 ,它们具有嗅觉结合蛋白的标志性结构域。进一步采用半定量RT PCR技术研究了它们的空间表达型 ,结果发现它们不但在雌蚊触角中表达 ,也在其他部位 (尤其是蚊虫足部 )有强的表达。这一发现说明疟蚊嗅觉结合蛋白可能具有更广的功能 ,也为进一步重组表达和功能研究提供了重要依据

摘要: 在室内条件下测试了土荆芥Chenopodium ambrosioides叶片的石油醚提取物及精油对冈比亚按蚊Anopheles gambiae02d龄成虫和14龄幼虫的毒性。每一龄期各取30头幼虫分别接触50,100,250,500,750和1000mg/L提取物和精油,于24h和48h后记录死亡幼虫的数目。30头成虫在密封的长方形玻璃笼子中分别接触0.8,1.6,2.4μL/L土荆芥精油蒸气,24h后记录死亡率。结果表明,测试的提取物和精油对冈比亚按蚊的各龄幼虫和成虫均具有毒性。48h致死中浓度(LC50)的测试结果表明,石油醚提取物对1龄幼虫的毒性最强(14.89mg/L),其次是对4龄幼虫(18.90mg/L),对3龄幼虫的毒性最低(183.77mg/L);精油对4龄幼虫毒性最强(36.62mg/L),其次是对1龄幼虫(90.75mg/L)。推算的土荆芥精油对冈比亚按蚊的LC50为1.01μL/L。本研究揭示了土荆芥对冈比亚按蚊的防治潜力。

摘要: 对采自尼日利亚南部城市阿贝奥库塔冈比亚按蚊复合体Anopheles gambiae complex的形态特征进行了研究。依据2005年8月至2006年7月灯诱捕获的364个冈比亚按蚊复合体标本,分别对它们的触角、翅、喙、前足、中足和后足6个部位的长度进行了测量,对月平均值进行回归分析,同时利用差异系数(coefficient of difference,CD)进行近缘分析。分析显示,各特征的长度平均值雨季大于旱季,但是回归分析表明长度变化与季节不显著相关(P>0.05)。差异系数分析结果表明,仅触角长度和翅长显示此复合体为两个不同的种群(CD>1.28),而其他特征值表明为同一种群。因此,该研究结果提示触角长度及翅长对冈比亚按蚊复合体近缘种的区分有重要参考价值。