摘要: 目的通过检测高脂高糖饲料饲喂加链佐脲菌素诱发的糖尿病兔结膜组织细胞的基质金属蛋白酶(MMPs)和基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPs),分析二者与眼结膜病变间关系。方法选取日本大耳白兔20只,随机分成2组。对照组喂饲普通实验兔饲料;实验组饲喂高脂高糖饲料8周后,耳缘静脉注射链佐脲菌素制备糖尿病模型。在完成模型制作后2周,2组兔经全身麻醉后分别选取双眼的球结膜组织(2 mm×3 mm)各1片。右眼球结膜用于常规病理观察;左眼球结膜用于MMP-1、MMP-3、MMP-9测定,以及TIMP-1、TIMP-3的检测。结果实验组中MMP-1、MMP-3和MMP-9表达高于对照组(P<0.05)。实验组中TIMP-1表达略高于对照组(P>0.05),但TIMP-3表达明显低于对照组(P<0.05)。实验组兔眼结膜上皮排列整齐,上皮下组织明显减少,结膜组织疏松,可见萎缩的筋膜组织,结膜固有层细胞松散,且细胞间炎性细胞增多。结论糖尿病兔结膜组织MMPs和TIMPs的平衡打破,使结膜组织中产生弹力纤维减少,结膜下组织疏松;筋膜萎缩的病理改变,使糖尿病兔结膜出现松弛,造成兔眼表微环境产生改变。

摘要: 目的探索制作快速、稳定可靠的兔动脉粥样硬化(AS)模型的方法。方法采用高脂饲料喂养结合动脉内膜球囊损伤的方法建立兔AS模型。选择健康雄性新西兰白兔20只,体质量2.0～2.5 kg,实施颈总动脉内膜球囊损伤术后予以高脂饲料喂养,于饲喂前和饲喂12周后,取耳缘静脉血测定总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FBG)及空腹胰岛素(FSI),计算胰岛素敏感指数(ISI)和稳态模型-胰岛素抵抗(HOMA-IR);在肉眼及光学显微镜下观察颈总动脉内膜形态特征。结果高脂饲喂12周后,可见体质量、TC、TG和LDL-C较饲喂前均显著升高(P<0.01); FBG无明显变化(P=0.550),FSI及HOMA-IR较饲喂前显著升高,HDL-C、ISI较饲喂前显著降低(P<0.01);颈总动脉内壁肉眼可见典型动脉粥样斑块,光学显微镜下见内膜明显增厚,形成明显的粥样斑块及纤维帽结构。结论高脂饲喂可导致兔胰岛素抵抗,联合动脉内球囊损伤法可以短期内成功制作兔AS模型。

摘要: 目的探讨应用心脏导管技术堵塞冠状动脉制作兔心肌梗死(MI)模型。方法 25只兔经全身麻醉后分离颈动脉,穿刺颈动脉,置入5F血管鞘并固定。从血管鞘送入指引导管至主动脉根部的窦底,利用微导丝将微导管送入左前降支中或远段,沿微导管向左前降支中注入明胶海绵颗粒栓塞剂或弹簧圈,使左前降支闭塞,从而制作MI模型。1个月后取出心脏,行病理检测MI面积。结果 25只兔共19只成功送入微导丝及微导管至左前降支。弹簧圈组兔10只,MI制作成功7只,饲养中死亡2只。明胶海绵颗粒栓塞剂组兔9只, MI制作成功7只,饲养中死亡1只。两组兔MI成功率及兔MI面积差异无统计学意义。结论通过心导管介入方法可制备兔MI模型,成功率高,MI特征稳定,可避免开胸损伤,更符合临床MI的病理特点。

摘要: 目的通过条件优选,采用静脉注射乙酰胆碱合并氯化钙（Ach-CaCl₂）混合溶液制备兔房颤（AF）模型。方法静脉注射Ach （66μg/m L）-CaCl₂（10 mg/mL）混合溶液诱发兔AF,单因素实验筛选混合溶液最佳的注射体积和注射速度以及最适的麻醉药种类;连续10 d尾静脉注射Ach （66μg/mL）-CaCl₂（10 mg/mL）混合溶液建立大鼠AF模型。心电图记录AF持续时间,Masson染色和HE染色观察AF兔心房组织病理学改变,并与大鼠AF模型进行比较。结果体积分数0.5%戊巴比妥钠麻醉兔的效果较好。相对于大鼠模型,混合溶液诱发的兔AF持续时间较长,连续10 d造模,兔AF持续时间波动较大,代偿性拮抗作用明显,延长造模时间,AF持续时间趋于平稳。造模28 d,AF持续时间可达80 s,且心房组织纤维化更加明显。结论 Ach-CaCl₂静脉注射,可制备兔AF模型,与大鼠AF模型相比,兔AF持续时间较长,房颤发作时f波和心室波混杂出现,与临床心电图表现相近。

摘要: 基因修饰(GM)家兔是生物医学研究极其重要的动物模型,过表达人类基因的家兔模型已经广泛用于人类心血管疾病、艾滋病和肿瘤等研究领域。到目前为止,制作转基因家兔模型绝大多数使用显微注射的方法,使外源基因随机插入到家兔基因组中。基于胚胎干细胞(ES细胞)的基因打靶技术是实现基因敲除(KO)、研究基因功能最有效的方法之一,然而,家兔缺乏稳定、可商业化使用的ES细胞系,所以利用ES细胞对家兔基因组进行编辑修饰是不可能实现的。近年来,新发展起来的以CRISPR-Cas9为代表的新的基因编辑技术,使得我们对家兔基因定点打靶突变和基因定点导入成为可能,并且利用这些技术已经成功培育了一批基因敲除家兔模型。基于我们的研究经历,本文简要回顾了GM家兔模型发展历史、研究进展以及在生物医学研究领域的应用。