摘要: 【目的】阐明在响应细菌感染的过程中,埃及伊蚊Aedes aegypti体内肽聚糖识别蛋白PGRPLC(Aa PGRP-LC)的功能。【方法】使用实时荧光定量PCR(q PCR)技术分析埃及伊蚊感染阴沟肠杆菌Enterobacter cloacae后不同时间抗菌肽(antimicrobial peptides,AMPs)基因的表达情况。结合RNA干扰技术和q PCR技术检测干扰Aa PGRP-LC后免疫相关基因转录模式的变化。使用原核表达系统表达Aa PGRP-LC,并通过Ni(2+)-NTA柱纯化,通过免疫印迹分析检测所纯化蛋白的质量。【结果】阴沟肠杆菌感染埃及伊蚊6 h后埃及伊蚊体内抗菌肽基因的转录水平显著升高。干扰Aa PGRP-LC并用阴沟肠杆菌感染后,埃及伊蚊体内重要抗菌肽基因的转录水平显著降低,同时埃及伊蚊免疫缺陷(immune-deficiency,IMD)通路和Toll信号(Toll-like receptors)通路的免疫相关基因的表达量也显著降低。纯化得到条带单一的Aa PGRP-LC蛋白。【结论】Aa PGRP-LC参与调控埃及伊蚊重要抗菌肽基因的转录,在埃及伊蚊响应细菌感染的过程中起到了重要的调控作用。Aa PGRP-LC在参与调控IMD通路的同时,也可能参与了Toll信号通路的调控过程。从原核表达系统中获得的Aa PGRP-LC重组蛋白可用于下一步的功能研究。

摘要: 【目的】明确小蓬草Conyza canadensis(L.)Cronq.精油的杀虫潜力及其活性成分。【方法】通过浸虫法和密闭熏蒸法测试了小蓬草精油对白纹伊蚊Aedes albopictus和致倦库蚊Culex pipiens quinquefasciatus幼虫及成蚊的毒杀活性,并利用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)对精油的挥发性成分进行了定性分析。【结果】小蓬草精油对白纹伊蚊1-4龄期幼虫及蛹的24 h LC50值分别为25.01,45.88,56.94,64.60和346.23μg/mL;对致倦库蚊幼虫1-4龄期幼虫及蛹的24 h LC50值分别为9.16,8.65,32.12,43.68和197.83μg/mL。在剂量分别为48,64,80,96,112和128μg/cm3时,小蓬草精油对白纹伊蚊成蚊的KT50值分别为28.81,22.31,20.38,17.05,13.92和9.74min;对致倦库蚊的KT50值分别为34.90,32.97,23.97,19.60,15.20和10.34 min。24 h熏蒸对白纹伊蚊和致倦库蚊成蚊的LC50值分别是75.46和99.19μg/cm3。小蓬草精油的GC-MS定性分析共分离鉴定出31种化合物,其中单萜类物质6种,倍半萜烯类物质17种,含氧萜烯类6种。【结论】结果表明小蓬草精油对这两种蚊虫的毒杀活性较高,具有深开发潜力。

摘要: 为探明羽裂蟹甲草Cacalia tangutica的杀虫活性及其活性成分,通过拌糖饲喂法和浸渍法测定了羽裂蟹甲草甲醇提取物对家蝇Musca domestica成虫和白纹伊蚊Aedes albopictus 4龄幼虫的毒杀活性,并采用色谱分离技术和现代波谱技术对羽裂蟹甲草中的化学成分进行了分离鉴定。结果表明: 该植物不同部位甲醇提取物对家蝇成虫和白纹伊蚊4龄幼虫均具有较高的生物活性。从该植物叶和花甲醇提取物中分离鉴定了豆甾醇、无羁萜、7-羟基-8-甲氧基香豆素、7-羟基香豆素、7,8-二羟基香豆素、瑞香素-8-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素、山奈酚和β-胡萝卜苷9个化合物。无羁萜、槲皮素和山奈酚为首次从该植物中分离得到,500μg/g拌糖处理48h后,其对家蝇成虫的校正死亡率分别为 88.30%,69.90%和77.04%; 50μg/mL药液处理72h后,其对白纹伊蚊4龄幼虫的校正死亡率分别为88.49%,72.22%和71.06%;均与鱼藤酮差异不显著(P<0.05) ,表现出良好的杀虫活性。本研究说明羽裂蟹甲草对家蝇和白纹伊蚊具有明显的毒杀活性,是一种潜在的卫生害虫控制剂。

摘要: 为利用转基因技术来探索新的蚊媒疾病防治方法 ,将登革病毒前膜蛋白基因prM重组入以转座子piggyBac因子为基础的载体 ,构建了昆虫转基因载体pB[PUBnls_EGFP_prM],在辅助质粒的作用下共同转染白纹伊蚊AedesalbopictusC6 36细胞。PCR和Southernblot证明构建的转基因载体可以将EGFP_prM基因整合入蚊虫基因组中。验证了转座子piggyBac因子、启动子polyubiquitin可以在白纹伊蚊中发挥功能 ,为进一步构建不传播登革病毒的转基因白纹伊蚊奠定了基础

摘要: 测定了我国尖音库蚊复合组和白纹伊蚊蚊虫体内感染的Wolbachia株的wsp基因序列。核苷酸和氨基酸的同源性及系统关系分析表明 ,我国尖音库蚊复合组和白纹伊蚊中Wolbachia株的wsp基因序列与Pip组其它株的核苷酸及氨基酸同源性分别为 98% 10 0 %和 97% 10 0 % ,属B大组Wolbachia中的Pip组。