摘要: 【目的】探究浙江省内中华蜜蜂Apis cerana cerana（简称中蜂）的常见疾病流行情况，为蜂农和学者实施疾病预防并改进蜜蜂健康管理提供帮助。【方法】于2023年7-12月采集浙江省内11个饲养点的74个中华蜜蜂工蜂蜂群，采用PCR及RT-PCR方法检测10种蜜蜂常见疾病病原在蜂群内的发病比例，分别是7种病毒病原：急性麻痹病毒（Acute bee paralysis virus,ABPV）、黑蜂王台病毒（Black queen cell virus,BQCV）、慢性麻痹病毒（Chronic bee paralysis virus,CBPV）、残翅病毒（Deformed wing virus,DWV）、以色列急性麻痹病毒（Israeli acute paralysis virus,IAPV）、克什米尔病毒（Kashmir bee virus,KBV）、中蜂囊状幼虫病毒（Chinese Sacbrood virus,CSBV）;2种细菌病原：欧洲幼虫腐臭病（European foulbrood,EFB）的病原蜂房球菌Melissococcus plutonius、美洲幼虫腐臭病（American foulbrood,AFB）的病原幼虫芽孢杆菌Paenibacillus larvae以及1种寄生虫病原：微孢子虫（Nosema spp.,NOS）。【结果】在中蜂样品中有DWV、IAPV、KBV、CSBV、NOS和EFB这6种病原存在，其中EFB、NOS、CSBV和DWV的病原检出率较高，EFB的病原在11个市（县）中蜂中检出，且有8个市（县）的检出率超过50%，甚至有3个市（县）检出率达100%，说明其感染能力很强。NOS在8个市（县）中蜂中均有检出，且有6个市（县）的检出率超过50%;CSBV在3个市（县）中蜂中检出，且有2个市（县）的感染率超过60%；有3个市（县）中蜂检测出DWV阳性，且有1个市（县）感染率达100%;IAPV和KBV偶有检出。并且出现多种混合感染模式（52.71%），其中双重感染模式EFB与NOS的混合感染最多，达到35.14%，其次是CSBV与EFB的混合感染（5.41%），此外还检测出三重感染的情况（5.41%）。【结论】浙江省中华蜜蜂感染EFB与NOS疾病的比例较高，同时存在一个蜂群感染2-3种病原的情况，说明浙江省中蜂蜂群存在一定的生存压力。调查结果对合理定制浙江省中蜂病害防治工作具有重要意义。

摘要: 【目的】本研究旨在探究我国油茶Camellia oleifera花期中华蜜蜂Apis cerana cerana粉源植物多样性及其对油茶传粉的贡献。【方法】对2015-2023年我国油茶9个种植区(三带九区) 99个油茶基地采集的中华蜜蜂标本洗刷其体表携带花粉，提取混合花粉DNA,进行ITS2区PCR扩增，基于Illumina PE250二代高通量测序技术进行测序；经Trimmomatic, FLASH和Usearch v10.0对原始序列进行质控、拼接和去嵌合体处理，以97%相似度划分可操作分类单元(operational taxonomic units, OTUs),基于NT数据库进行物种注释。采用Past v4.17计算Simpson指数、Shannon指数、Chao1指数及Margalef指数等Alpha多样性指数值，利用SPSS v26.0进行单因素方差分析与LSD检验，分析不同种植区油茶花期中华蜜蜂的粉源植物组成、丰度和多样性。【结果】共注释到油茶花期中华蜜蜂粉源植物33目58科85属150种。不同油茶种植区花期中华蜜蜂粉源植物组成和丰度不同，总占比超过1.00%的粉源植物共有13种。其中油茶花粉的相对丰度较低，为0.03%～23.33%。中带油茶种植区的粉源植物Simpson指数、 Shannon指数、 Chao1指数和Margalef指数值最高(分别为0.75±0.14, 2.01±0.52, 85.04±21.53和7.30±1.84),北带的分别为0.56±0.17, 1.22±0.36, 35.99±3.11和2.76±0.30,南带的分别为0.43±0.14, 1.10±0.25, 77.74±9.71和6.60±0.78,多样性较低。在油茶种植区的层面上，Ⅱc(中带贵州高原区)的粉源植物Simpson指数、 Shannon指数、 Chao1指数和Margalef指数值最高(分别为0.87±0.00, 2.44±0.06, 101.97±11.33和8.33±0.58)、 Ia(北带东部桐柏山大别山低山丘陵区)的最低(分别为0.40±0.00, 0.90±0.01, 34.07±1.85和2.82±0.37)。去除油茶花粉后，不同油茶种植区的伴生粉源植物的相对丰度存在显著地域差异，优势种包括鬼针草Bidens pilosa、甘菊Chrysanthemum lavandulifolium、蔓菁Brassica rapa及假弯曲碎米荠Cardamine fallax(最高相对丰度分别为85.05%, 75.71%, 43.99%和35.38%)。【结论】中华蜜蜂是我国油茶的传粉昆虫之一，其体表携带花粉中油茶花粉的含量在不同地区差异性显著。油茶花期中华蜜蜂粉源植物资源丰富，且存在明显的区域性差异。

摘要: 【目的】昆虫的表皮是维持昆虫形态、抵御病原以及外界环境变化的主要保护屏障。本研究旨在通过RNA干扰（RNA interference,RNAi）检测中华蜜蜂Apis cerana cerana柔软表皮蛋白flexible cuticle protein 12 (FCP12)对CSBV病毒感染的影响。【方法】采用生物信息学分析鉴定AcFCP12序列特征，通过qRT-PCR检测CSBV感染前后中蜂AcFCP12的转录水平；通过原核表达系统对中华蜜蜂AcFCP12进行表达、纯化及其抗体制备；利用L4440载体表达双链ds AcFCP12，采用RNAi干扰技术下调中蜂幼虫AcFCP12的表达，再对其进行CSBV病毒感染实验，通过qRT-PCR检测AcFCP12和CSBV衣壳蛋白基因VP1的表达量，分析CSBV病毒感染与中蜂表皮蛋白AcFCP12的相关性。【结果】生物信息分析表明，中蜂AcFCP12包含一个几丁质结合域，具有RR1基序，表明该基因编码柔软表皮蛋白。qRT-PCR结果显示，AcFCP12在CSBV病毒感染24 h和48 h分别下调了86%和40%。通过原核克隆表达成功获得约12 kD的AcFCP12重组蛋白并制备了特异性较好的鼠多克隆抗体。利用L4440载体系统成功获得AcFCP12的双链RNA,RNAi实验表明，AcFCP12基因表达下调了65%。通过下调AcFCP12表达后再进行CSBV病毒感染，qRT-PCR结果显示CSBV的VP1基因表达量显著增加了33%。【结论】CSBV病毒感染中蜂引起AcFCP12表达量降低，下调AcFCP12表达后导致CSBV病毒增殖加剧，表明中华蜜蜂AcFCP12在抵御CSBV感染时发挥重要作用，研究结果为阐明CSBV病毒对中蜂的感染机制奠定基础。

摘要: 在中华蜜蜂 (Apiscerana)工蜂毒腺cDNA文库内发现了一个插有 110 4bp外源片段的克隆 ,内含一个 76 5bp的开放阅读框架 (ORF) ,编码一个含有 2 5 4个氨基酸残基的依赖于 2 ,3-二磷酸甘油酸的磷酸甘油变位酶(dPGAM) ,催化 3 磷酸甘油和 2 -磷酸甘油之间的转化。推测的氨基酸序列与其他 7种生物的dPGAM的相似性很高 (39% - 88% ) ,而与其他 4种不依赖于 2 ,3 二磷酸甘油酸的磷酸甘油变位酶 (iPGAM )的相似性则很低(10 % - 12 % ) ,氨基酸序列的多重联配表明组成dPGAM活性位点的氨基酸残基在包括中华蜜蜂在内的所有生物体内是十分保守的 ,Ac PGAM是一种典型的dPGAM。这是昆虫纲中继在果蝇中发现PGAM基因后的第 2个昆虫dPGAM基因 ,其对PGAM基因的结构与功能研究及对昆虫的分子生物学研究具有意义。同时 ,对PGAM的进化关系的分析表明该基因可以用作研究物种系统关系的一个依据。

摘要: 从中华蜜蜂工蜂毒腺中快速抽提总RNA ,用RT PCR方法扩增得到该蜂毒的透明质酸酶 (AcHya)基因 ,其核苷酸序列全长为 1 1 6 4bp ,可编码 3 87个氨基酸残基 ,预计分子量为 42 .6kD。将所推导出的氨基酸序列与其它 6种透明质酸酶 (Hya)氨基酸序列比较 ,结果表明 ,AcHya与意大利蜜蜂Hya非常相似 ,具有91 %的同源性 ,与长黄胡蜂Hya、常见黄胡蜂Hya、、马蜂Hya、吸血沙蠓唾腺Hya、人精液PH2 0Hya的同源性分别为 5 4 %、5 2 %、46 %、2 7%和 2 0 %。同时根据氨基酸序列用GENETYX程序绘制了 7种Hya的分子系统树 ,并根据同源性比较分析了 7种Hya的保守性、结构与功能的关系