摘要: 【目的】探究过表达ace-miR-14-y对中华蜜蜂Apis cerana cerana工蜂幼虫靶基因表达及个体和肠道重量的影响，进而揭示ace-miR-14-y的潜在调控作用。【方法】使用茎环RT-PCR和Sanger测序验证ace-miR-14-y的表达和序列。采用相关软件预测和分析ace-miR-14-y的靶基因。通过饲喂模拟物（Mimic）进行幼虫肠道中ace-miR-14-y的过表达。利用RT-qPCR检测ace-miR-14-y的过表达效果及过表达ace-miR-14-y后靶基因的相对表达量。使用电子天平对幼虫个体和肠道进行称重。【结果】ace-miR-14-y在工蜂幼虫肠道中存在和表达；ace-miR-14-y共靶向265个基因，涉及33个GO条目与180条KEGG通路；，mimic-miR-14组ace-miR-14-y的表达量显著高于mimic-NC组（P<0.05）；过表达ace-miR-14-y后，靶基因Wg和AP-1的表达量均显著下调（P<0.05），幼虫个体和肠道的重量均极显著上升（P<0.01）。【结论】过表达ace-miR-14-y显著影响中华蜜蜂工蜂幼虫肠道中靶基因Wg和AP-1的表达及幼虫个体和肠道的重量，ace-miR-14-y通过调节Wg和AP-1表达发挥潜在的调控作用。

摘要: 【目的】探究台基直径对中华蜜蜂Apis cerana cerana人工育王效果的影响，优化中华蜜蜂人工育王技术操作方法。【方法】开展中华蜜蜂人工育王实验，比较直径为6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0和12.0mm的7种台基对王台大小、蜂王出房率、蜂王初生重的影响，并基于主成分分析法对蜂王初生形态指标进行综合评价。【结果】不同直径台基建造的王台尺寸经中华蜜蜂改造后差异较小，但显著影响蜂王出房率和跗节长、胫节长、背板5宽、头长、头宽、上颚宽形态指标（P<0.05）。使用7.0mm直径台基培育蜂王出房率较高，蜂王形态综合评价排序为7.0 mm>6.0 mm>9.0 mm>8.0 mm>10.0 mm。【结论】建议中华蜜蜂人工育王生产上优先选择7.0 mm直径台基。

摘要: 蜜蜂肠道菌群由一组特定的细菌组成，在宿主营养代谢、免疫调节及解毒等方面发挥重要作用。本研究对一来自中华蜜蜂Apis cerana cerana工蜂肠道的菌株——G0441进行了分离、鉴定以及基因组分析。G0441菌体呈圆形，直径约1 mm，表面光滑，半透明；严格厌氧生长。基于16S rRNA基因序列分析结果可知：G0441菌株属于γ变形菌纲，Orbaceae科，其最近的近缘种均为Gilliamella属物种。G0441基因组大小为2.6 Mb，总GC含量比值为35%；基因组编码2 350个基因，其中包括2 299个蛋白编码基因，蛋白编码基因序列长度占比为85%。对蛋白编码基因进行COG功能分类注释，结果显示：氨基酸转运和代谢、碳水化合物转运和代谢、翻译-核糖体结构与生物发生、转录、复制-重组-修复、细胞壁/细胞膜/包膜生物发生等功能类别得到显著富集。此外，从G0441基因组中还注释得到159个毒力因子、77个耐药基因、22个碳水化合物活性酶、255种转运蛋白、565个跨膜蛋白基因、201个信号肽蛋白基因及多个脂蛋白基因。泛基因组分析显示：在6种近缘菌株的同源基因中，存在145个共有基因（Core gene）和7 190个特有基因（Specific gene），其中，G0441含有221个特有基因。基于core单拷贝基因和全基因组SNP位点的系统进化树分析均表明：G0441与Gilliamella sp. ESL0441菌株亲缘关系最为接近。本研究分离并鉴定了一种中华蜜蜂肠道菌Gilliamella菌株（命名为Gilliamella sp. G0441）。本研究获得的菌株基因组信息为进一步探索Gilliamella sp. G0441相关功能奠定基础。

摘要: 【目的】本研究旨在通过测定中华蜜蜂Apis cerana cerana蛋白磷酸酶2A（Protein phosphatase 2A ,PP2A）基因AcPP2A的时空表达谱和解析AcPP2A蛋白的理化性质和分子特征，为进一步研究PP2A在中华蜜蜂生长发育中的功能提供参考和基础。【方法】通过RT-qPCR检测AcPP2A在中华蜜蜂工蜂的触角、中肠、脑、毒腺、表皮、咽下腺和脂肪体等组织，卵、幼虫、预蛹和蛹及不同日龄工蜂成虫中的相对表达量。使用NCBI网站上的ORF工具，Expasy网站上的Protparam、ProtScale和SWISS-model软件，SignalP4.1 Server、NetPhos 3.1 Server、TMHMM和SOPMA等软件预测AcPP2A蛋白的分子特征和理化性质，鉴定中华蜜蜂和其他物种PP2A的保守基序和结构域，并构建系统进化树。【结果】AcPP2A含有5 174个核苷酸，可编码475个氨基酸；AcPP2A的蛋白分子量约为54.78 kD，脂溶系数为78.80，等电点为5.97，分子式为C₂₄₁₁H₃₇₈₁N₆₇₁O₇₄₂S₂₃，平均亲水系数为﹣0.521;AcPP2A不含跨膜结构域和信号肽。中华蜜蜂、无刺蜂Melipona quadrifasciata、西方蜜蜂Apis mellifera、美洲东北熊蜂Bombus impatiens、橡子蚂蚁Temnothorax curvispinosus、苜蓿切叶蜂Megachile rotundata、火红熊蜂Bombus pyrosoma、巴西无刺蜂Frieseomelitta varia、顶切叶蚁Acromyrmex echinatior、东南蓝莓蜂Habropoda laboriosa、鸭嘴海豆芽Lingula anatina的PP2A含有相同的6个保守基序（Motif1、Motif2、Motif3、Motif4、Motif5和Motif6）和1个相同的结构域（CDC55超家族）。中华蜜蜂与橡子蚂蚁的PP2A在进化树上聚为一支。【结论】AcPP2A是潜在的酸性蛋白、亲水性蛋白和非跨膜胞内蛋白，具有较高的保守性；AcPP2A的表达存在组织及发育阶段的广泛性和差异性，在毒腺和卵发育中可能发挥重要功能。

摘要: 【目的】长白山中华蜜蜂Apis cerana cerana in Changbai Mountain是在长白山独特的自然生态环境中，历经长期的自然选择压力而形成的东方蜜蜂Apis cerana的一个生态类型，对当地冬季严寒，无霜期短等严酷自然环境具有显著的生态适应性。本研究旨在探究越冬期特定环境下长白山中华蜜蜂耐寒适应性相关的代谢物和代谢通路。【方法】以越冬中期的长白山中华蜜蜂为研究对象，采用液相色谱-质谱联用技术（Liquid chromatography mass spectrometry, LC-MS）对比越冬期（12月）和非越冬期（8月）工蜂肠道组织中代谢物的变化。【结果】越冬蜂和非越冬蜂个体在正、负离子模式下分别获得125和219个差异代谢物，在正、负离子模式下最显著差异的代谢物中筛选得到褪黑素、异鼠李素、飞燕草素、亚油酸、亚麻酸、喹啉酸、犬尿氨酸、硫胺素、吡哆醇和紫丁香苷等多种与蜜蜂抗氧化损伤、抗微生物侵染、抗寒、营养和能量物质的合成与代谢相关的差异代谢物。差异代谢物显著富集于嘌呤代谢、磷酸戊糖途径、糖基磷脂酰肌醇（Glycosylphosphatidylinositol,GPI）锚生物合成以及硫中继系统、烟酸和烟酰胺代谢、丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢等KEGG通路。【结论】长白山中华蜜蜂主要通过调节抗氧化代谢和能量物质合成代谢应对越冬期逆境胁迫，研究结果初步阐释了长白山中华蜜蜂耐寒适应性的代谢特点和调控基础。