摘要: 蜜蜂残翅病毒(Deformed wing virus, DWV)广泛存在于我国规模化养殖的蜂群中,具有明显的季节流行特征。近年来,DWV不断向野生授粉昆虫及其它昆虫传播,包括蜜蜂新的寄生性病害蜂箱奇露尾甲Aethina tumida。前期本实验室已鉴定来源于中华蜜蜂Apis cerana与意大利蜜蜂Apis mellifera的蜂箱奇露尾甲均感染了蜜蜂病毒,但未调查来源于同一群的蜜蜂与蜂箱奇露尾甲是否感染了同一病毒,且在进化上有无差异。本研究调查了来源于同一群的中蜂及蜂箱奇露尾甲感染病毒情况,发现只感染了蜜蜂残翅病毒A型(DWV-A),未发现其它病毒。对DWV-A的3个片段进化分析表明,虽然DWV-A同时感染了中华蜜蜂和蜂箱奇露尾甲,但是VP3基因在不同的寄主中呈现明显不同的亲缘关系。这一结果为蜜蜂残翅病毒在蜜蜂及寄生病害中的进化提供了数据,为进一步研究病毒在不同寄主间的传播与进化奠定了基础。

摘要: 蜜源木本植物的鉴定能为中华蜜蜂Apis cerana cerana保护和利用提供依据。本研究从在秦岭地区收集的4份中华蜜蜂蜂蜜中分离出植物花粉,然后在扫描电镜下观察花粉形态,根据花粉大小、赤道面观、极面观、表面纹饰对花粉所属植物的种类进行鉴定。共鉴定出中华蜜蜂利用的蜜源木本植物13科,19属,20种。其中以壳斗科Fagaceae、忍冬科Caprifoliaceae最多,卫矛科Celastraceae、桦木科Betulaceae、蔷薇科Rosaceae次之。这些蜜源木本植物中有13种是药用植物。秦岭地区丰富的蜜源木本植物为中华蜜蜂的生存提供了食物资源;同时中华蜜蜂作为传粉昆虫,对维持秦岭地区蜜源植物的生存和生态系统稳定起着重要的作用。

摘要: 为了解浙江省金华市中华蜜蜂的遗传多样性及遗传分化现状,基于mtDNA tRNA~(leu)～COⅡ序列对金华市9个区县市共81个中蜂样本进行序列测定,分析了金华市中蜂群体的遗传多样性、遗传结构和遗传分化情况。结果共发现14个单倍型,其中主体单倍型JH1为9个地理群体所共享,与已报道的福建省中蜂主体单倍型以及浙江省丽水市的中蜂主体单倍型相同。金华市中蜂的平均单倍型多样度为0.610,平均核苷酸多样度为0.00162,遗传多样性低于浙江省丽水市中蜂。分子变异分析(AMOVA)显示,金华市中蜂不同地理群体间具有明显的遗传分化(F_(ST)=0.212,P<0.01),但大多数遗传变异存在于群体内(78.79%),群体间的遗传变异为21.21%。进一步分析发现金东区、浦江县与金华市其它中蜂地理群体之间存在显著的遗传分化,东阳市与金华市其它群体间的遗传距离也较大。中性检验结果表明,金华市中蜂可能经历过群体扩张。相关研究结果对浙江省金华市中华蜜蜂的资源保护与合理开发利用具有重要意义。

摘要: 磷脂酶A2 (PLA2)对细胞膜流动性、膜蛋白活性等细胞生理功能有重要调节作用。高温等环境压力对细胞的生理代谢有较大的影响,其在生物体抗逆过程中的调控作用一直备受关注。本研究以中华蜜蜂Apis cerana ceranaPLA2基因序列为基础,对其蛋白结构进行预测,分析该基因在不同温度和高温不同胁迫时间下的表达差异,以揭示该基因在中华蜜蜂抗高温过程中的生理功能。结果显示,中华蜜蜂PLA2基因包含745 bp的开放阅读框,编码169个氨基酸,蛋白分子量为19.3 kDa,无跨膜结构,不属于膜蛋白。氨基酸同源序列比对结果显示,中华蜜蜂PLA2序列与蜜蜂科昆虫的相似性最高,与其他膜翅目昆虫的相似性存在差异。qRT-PCR结果显示,PLA2基因在35℃、40℃和45℃处理下的表达量较高,较高的温度能诱导该基因表达的增加。同时,PLA2基因的表达受高温胁迫时间的影响,较长时间的高温胁迫导致PLA2基因的表达增加。本研究结果表明PLA2在中华蜜蜂应对高温胁迫时发挥重要生理功能。

摘要: 为了更好地筛选出中华蜜蜂气味受体基因AcerOr1有效干扰序列,本研究以中华蜜蜂气味受体基因AcerOr1为靶标,分别选取3个片段AcerOr1-1(429 bp)、AcerOr1-2(218 bp)和AcerOr1-3(543 bp),并构建相应的dsRNA表达载体,获取dsRNA后通过单只饲喂进行体内RNAi实验,运用qPCR和Western blot从mRNA水平和蛋白水平检测干扰效率。实验结果显示:片段大小429 bp组dsAcerOr1-1和对照组mRNA表达量之间不具有显著的统计学差异(P>0.05),片段大小为218 bp的dsAcerOr1-2组和片段大小为543 bp的dsAcerOr1-3组对AcerOr1表达量都有显著的抑制(P<0.05),抑制率分别为88.85%±0.12%和69.16%±1.06%,以片段大小为218 bp的dsAcerOr1-2干扰效果最佳。Western blot结果显示:与mRNA表达水平检测结果一致,饲喂dsAcerOr1-1 AcerOr1蛋白的表达量与对照组差异不显著(P>0.05),而饲喂dsAcerOr1-2和dsAcerOr1-3后AcerOr1蛋白的表达量均受到显著抑制(P<0.05)。本试验成功构建AcerOr1基因干扰载体,最终确定218 bp的dsAcerOr1-2为最佳干扰片段,证实其能有效抑制目的基因mRNA和蛋白的表达,为进一步研究该基因的体内外功能奠定了基础。