摘要: 应用ＬＣ－６Ａ高效液相色谱仪（ＨＰＬＣ）检测非感染与感染马来丝虫微丝蚴中华按蚊的血淋巴，均测出２０种游离氨基酸。经统计处理这些氨基酸的变化为：１．非感染中华按蚊的氨基酸总量于血餐后第５天比刚羽化后来吸血蚊增加３７％，以后一直维持在增加水平，但第１２天增加量稍减为２１９％。感染马来丝虫中华按蚊的氨基酸总量于血餐后第５天锐减２５．９％，第１２天又增加到２９．０％。２．两组蚊各种氨基酸变化多与其总量变化一致。而感染蚊与非感染蚊比较，则有１５种氨基酸含量具显著性差异（Ｐ＜０．０５），①谷氨酰胺、酪氨酸于血餐后１２ｄ前一直明显增加，甘氨酸＋苏氨酸、蛋氨酸于血餐后１２ｄ量显著增加；天门冬氨酸血餐后５ｄ量减少，１２ｄ也增加。②谷氨酸、丝氨酸、精氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、赖氨酸血餐后１２ｄ前量均减少。③鸟氨酸血餐后５ｄ消失，１２ｄ又复出现，苯丙氯酸血餐后１２ｄ前一直未检出。

摘要: 棉纱蚊帐浸泡二氯苯醚菊酯５００ｍｇａｉ／ｍ２在实验小屋试验，浸帐后１年内对中华按蚊和三带喙库蚊的平均毒杀死亡率分别为７８．９％和８０．２％，吸血率为０．２７％和０．２３％，在蚊帐穿孔条件下，即蚊帐每个穿孔的面积为１０×１０ｃｍ，所有孔的面积之和占蚊帐面积的５％，浸帐后７个月内对中华接蚊和三带喙库蚊的平均死亡率为８４．５％和９４．５％，且可降低吸血率，中华按蚊为４４．９％，三带喙库蚊为６６．９％。同时发现二氯苯醚菊酯浸帐有明显阻止蚊虫飞入屋内的现象，阻止入屋率，中华按蚊７７．４％，三带喙库蚊７６．７％；而以溴氰菊酯２５ｍｇａｉ／ｍ２浸帐作比较则无此现象。研究结果证明，二氯苯醚菊酯浸泡蚊帐具有毒杀、接触兴奋驱避和降低吸血率及阻止蚊虫入屋的作用。

摘要: 【目的】为明确保幼激素受体Methoprene-tolerant基因AsMet在中华按蚊Anopheles sinensis体内的时空表达模式，并探究其对中华按蚊生殖调控和发育的影响。【方法】基于中华按蚊转录组数据，采用RACE克隆AsMet全长cDNA序列并进行分子特征分析；利用qPCR分析AsMet在不同发育阶段(蛹和雌成蚊)、 3日龄雌成蚊不同组织[头、胸、腹部前端(腹部前3节)、腹部后端(腹部剩余部分)、中肠、马氏管、脂肪体、卵巢和体壁]中的表达量；通过向中华按蚊末期雌蛹显微注射dsAsMet进行RNAi后，测定AsMet,AsKr-h1和AsVg的表达量，并观测雌成蚊卵巢发育情况、羽化率、产卵量和卵孵化率。【结果】中华按蚊AsMet(GenBank登录号：OR783325)的cDNA序列全长6 841 bp,开放阅读框(open reading frame, ORF)长3 159 bp,编码1 052个氨基酸，预测其分子质量为114.46 kD,等电点为6.63。AsMet有4个保守结构域，包括1个螺旋-环-螺旋结构域、 2个PAS结合域和1个C末端保守基序。AsMet与冈比亚按蚊An.gambiae、埃及伊蚊Aedes aegypti和尖音库蚊Culex pipiens的Met聚为一支。AsMet在化蛹后30 h和成蚊大部分阶段显著高表达，且在雌成蚊头和胸部中显著高表达，在中肠、马氏管和卵巢中呈现低表达。显微注射dsAsMet到末期雌蛹后24, 48和72 h时，AsMet的表达量较显微注射dsEGFP的对照组分别下调70.05%, 41.05%和68.64%,羽化率低于显微注射dsEGFP且在雌蚊交配吸血后卵巢发育不良，产卵量比正常注射dsEGFP的低67.58%,卵孵化率比正常注射dsEGFP的下降93.10%。【结论】AsMet表达被降低后影响中华按蚊卵巢的正常发育且使产卵量和孵化率显著降低。研究结果为深入研究JH调控中华按蚊生殖发育机理奠定基础，对保幼激素信号通路和昆虫生殖调控的分子机制的认识提供理论依据。

摘要: 【目的】克隆中华按蚊Anopheles sinensis化学感受蛋白3(chemosensory protein 3, CSP3)基因AsCSP3,分析该基因在丙烯菊酯驱避作用中的功能。【方法】采用RT-PCR方法克隆AsCSP3的全长cDNA序列；qRT-PCR检测AsCSP3在拟除虫菊酯抗性和敏感中华按蚊的4龄幼虫、早期雌蛹、晚期雌蛹、新羽化雌成蚊、羽化后第1, 3, 6和9天雌成蚊等不同发育阶段，3日龄雌成蚊触角、去掉触角的头部、去掉足的胸、腹和足等不同组织中的表达量以及0.05%丙烯菊酯熏蒸拟除虫菊酯抗性3日龄雌成蚊后不同时间的表达量；运用荧光竞争结合实验测定AsCSP3重组蛋白与丙烯菊酯、溴氰菊酯和氯菊酯的结合能力；利用CRISPR/Cas9介导的敲入技术突变AsCSP3,比较研究丙烯菊酯和溴氰菊酯对AsCSP3突变体和野生型中华按蚊的驱避作用。【结果】克隆了中华按蚊AsCSP3的全长cDNA序列，编码183个氨基酸，具有化学感受蛋白典型的保守半胱氨酸位点。AsCSP3在晚期雌蛹和新羽化雌成蚊中表达量高。AsCSP3主要在3日龄雌成蚊触角和足中表达，在抗性中华按蚊3日龄雌成蚊足中的表达量显著低于敏感中华按蚊中的，而在抗性中华按蚊触角和去除触角的头中的表达量显著高于敏感中华按蚊的；AsCSP3的表达量在丙烯菊酯诱导后2 h开始显著下调，直至24 h表达量仍然显著低于未处理的对照组的。AsCSP3重组蛋白能够结合溴氰菊酯和丙烯菊酯，而不能结合氯菊酯。AsCSP3的突变不影响中华按蚊的生长、发育、生殖力和吸血行为，也不影响溴氰菊酯的接触驱避作用，但削弱了丙烯菊酯的空间驱避作用，导致野生型中华按蚊在3 min时间内的起飞次数和飞行时间分别比AsCSP3突变体高出1.77和1.97倍。【结论】AsCSP3与丙烯菊酯的空间驱避作用可能存在潜在关联。

摘要: 【目的】探究中华按蚊Anopheles sinensis无锡株溴氰菊酯的抗性关联单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphism, SNP）位点和基因。【方法】对中华按蚊无锡株溴氰菊酯抗性品系（WX-LR）和敏感品系（WX-LS）杂交构建的F₂群体进行0.04%溴氰菊酯处理，测定击倒时间；采用混合群体分离分析（bulked segregant analysis, BSA）和全基因组测序相结合的方法，对获得的中华按蚊极端抗性个体和极端敏感个体混池进行全基因组重测序，筛选与溴氰菊酯抗性关联的SNP位点；采用SNP-index（SNP基因型频率）计算和候选区域定位以筛选与溴氰菊酯抗性关联的数量性状位点（quantitative trait loci, QTL）,并对候选QTL基因进行GO功能注释和KEGG通路富集；筛选溴氰菊酯抗性关联的关键基因。【结果】与中华按蚊溴氰菊酯抗性关联的SNP位点主要集中在2号和3号染色体上。99%置信区间ΔSNP-index全部分布在2号染色体上，包括12个与溴氰菊酯类抗性关联的QTL和672个功能注释的基因。最终筛选到12个溴氰菊酯抗性关联的关键基因，包括6个Trypsin基因，4个锌指蛋白基因，OAT基因和CYP4J5基因，其涉及杀虫剂代谢解毒酶和有机阴离子转运等。【结论】基于BSA测序（BSA sequencing, BSA-seq）鉴定中华按蚊无锡株溴氰菊酯抗性直接关联的基因，为深入了解中华按蚊对溴氰菊酯类杀虫剂抗性的分子机制奠定了基础。