摘要: 采用PCR-DGGE(PCR-denaturing gradient gel electrophoresis)方法研究了综合养殖池塘中三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)、草鱼(Ctenopharyngodon idella)、鳊(Parabramis pekinensis)、银鲫(Carassius auratus gibelio)、青鱼(Mylopharyngodon piceus)和鳙(Aristichthys nobilis)的肠道细菌组成,并分析了水体中的浮游细菌对鱼、蚌肠道细菌的影响。研究结果表明,三角帆蚌和混养鱼类肠道细菌属于厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)、疣微菌门(Verrucomicrobia)、蓝细菌(Cyanobacteria)、梭杆菌门(Fusobacteria)。其中,三角帆蚌肠道优势菌群为不动杆菌属(Acinetobacter)、志贺氏菌属(Shigella)和分枝杆菌属(Mycobacterium),草鱼肠道优势菌群为梭菌属(Clostridium),鳊肠道优势菌群为梭菌属和假单胞菌属(Pseudomonas),银鲫肠道优势菌群为不动杆菌属和志贺氏菌属,青鱼肠道优势菌群为梭菌属和不动杆菌属,鳙肠道优势菌群为不动杆菌属和弧菌属(Vibrio)。三角帆蚌与银鲫肠道细菌谱带相似性较高,草鱼与鳊肠道细菌谱带相似性较高,表明鱼类肠道细菌组成特点与食性存在一定的关系。水体浮游细菌优势菌群为类芽孢杆菌属(Paenibacillus)。三角帆蚌及鱼类肠道细菌群落与水体浮游细菌群落组成相似性较低,表明水体浮游细菌对三角帆蚌和鱼类肠道细菌优势菌群的影响有限。

摘要: 三角帆蚌(Hyriopsis cumingii)是中国生产淡水珍珠的当家品种。大规模人工育珠生产只有近30年历史[1]。从采集野生蚌进行人工育苗,到目前完全用养殖蚌做亲本留种繁殖,一直没有开展以珍珠颜色为目标的定向人工选育。目前三角帆蚌无核珍珠的颜色仍然保持了天然杂合状态,包涵有黄、白、紫等基本色系,每种色系又包含很多色度(颜色深浅),但绝大多数珍珠呈不同深浅的黄色,普遍被接受的纯白色和富有特色的深紫色很少。为了获得颜色纯净度高的珍珠,一般需对珍珠进行优化处理和加工,包括人工分拣、漂白、着色、增光等[2]。经加工过的珍珠,表面结构出现不同程度破坏,使光泽度下降,严重影响珍珠品质[3]。在养殖环节上定向生产颜色纯度高的珍珠对提高淡水珍珠质量,提升产业技术水平具有重要意义。

摘要: 对三角帆蚌HSP70基因序列进行全长克隆及其分子生物学分析,并检测其在不同水温刺激下鳃组织中的表达变化。通过高通量转录组测序获得三角帆蚌HSP70基因(Hc HSP70)长片段,采用3′RACE对其进行了3′末端克隆,经拼接得到Hc HSP70 c DNA全长序列。采用多种分子生物学软件对Hc HSP70 c DNA全长序列进行了特征分析,采用实时荧光定量PCR技术检测了其组织分布,并结合Western-blot技术检测蚌鳃中该基因m RNA与蛋白经不同水温刺激后的表达变化。结果显示,Hc HSP70 c DNA全长为2298 bp,其中开放阅读框为1974 bp,编码657个氨基酸。预测分子量大小为71.6 Ku,p H7.0时的理论等电点为5.61。氨基酸序列分析表明,Hc HSP70氨基酸序列含HSP70家族的3个标签序列(I9DLGTTYS16、I197FDLGGGTFDVSIL210和I336VLVGGSTRIPKVQK350),与长牡蛎及泥蚶的HSP70同源性最高(91%)。实时荧光定量PCR检测结果显示,Hc HSP70在鳃、性腺、肝胰腺、外套膜及肌肉等5种被检组织中均有表达,以肝胰腺中的表达水平最高。实时荧光定量PCR与Western-blot技术检测皆表明,蚌鳃组织中Hc HSP70基因与蛋白的表达量在37℃时达到最高,而在40℃水温刺激下表达水平下调至正常值,表明其在适应高温刺激时发挥了重要作用。

摘要: 肽聚糖识别蛋白(PGRPs)是机体先天免疫系统中的重要模式识别受体,研究对三角帆蚌的一种短型肽聚糖识别蛋白进行了克隆与表达分析。研究采用5′、3′RACE技术,对高通量转录组测序所得三角帆蚌PGRPS3基因(hc PGRPS3)片段分别进行了5′,3′末端克隆,经拼接得到hc PGRPS3 c DNA全长序列。采用多种分子生物学软件对hc PGRPS3 c DNA全长序列进行了特征分析,实时荧光定量(q RT-PCR)检测了其组织分布,及经肽聚糖(Peptidoglycan,PGN)和脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)刺激后其在肝胰腺中的基因表达变化。hc PGRPS3 c DNA全长1438 bp,开放阅读框为858 bp,编码285个氨基酸,预测分子量大小为32.3 ku,p H 7.0时的理论等点为7.98。序列中不存在信号肽与跨膜结构。氨基酸序列保守性分析表明,其他物种短型PGRP中,以夏威夷短尾鱿PGRP4与hc PGRPS3同源性最高(51%)。q RT-PCR检测结果显示,hc PGRPS3在性腺及肝胰腺中表达水平较高。经PGN或LPS刺激后,肝胰腺中hc PGRPS3表达水平显著上调,表明hc PGRPS3可能在机体抗菌免疫反应中发挥重要作用。

摘要: 为研究不同水体Ca~(2+)浓度(10—80 mg/L)下三角帆蚌生长和珍珠质沉积量和晶体结构的变化,采用鱼蚌混养的养殖模式养殖10周。结果表明,1龄幼蚌生长的适宜Ca~(2+)浓度为40 mg/L,2龄未植片三角帆蚌生长的适宜Ca~(2+)浓度为40—70 mg/L,2龄植片三角帆蚌珍珠沉积的适宜Ca~(2+)浓度为40 mg/L。拉曼光谱分析和珍珠层小片的扫描电镜观察结果表明,适宜Ca~(2+)浓度影响三角帆蚌珍珠质沉积可能是通过促进外套膜组织有机基质分泌从而调节Ca CO_3晶体形成和生长实现的。研究结果提示,在三角帆蚌生长快速季节,养殖水体中添加一定的钙源如生石灰等将有利于蚌体和珍珠的生长。同时研究结果也为加快珍珠培育,提高珍珠品质提供理论依据和实践操纵手段。