摘要: 为开发安全有效的疫苗以预防虹鳟传染性造血器官坏死病毒(IHNV)暴发。研究重点开发了以香豆素为佐剂的IHNV灭活疫苗,疫苗安全性实验证明IHNV病毒液已被完全灭活。实验分为对照组、疫苗组和香豆素+疫苗组。疫苗注射剂量为150μL,对照组注射同等剂量的磷酸盐缓冲溶液(PBS),在疫苗接种14d(D14)后进行IHNV攻毒实验,并在D7、D14、D15、D21、D30进行虹鳟脾脏和血清的样本采集。IHNV攻毒后显示,香豆素+疫苗的存活率为66%,而单一灭活疫苗和对照组的分别为62%和24%。组织病理学分析显示, IHNV攻毒后香豆素+疫苗组脾脏组织损伤最小,出现轻微的炎症反应,而对照组出现严重的黑色素巨噬细胞中心(MMC)和组织炎症(TI)。此外,在D7—D30,香豆素+疫苗组血清的总超氧化物歧化酶(T-SOD)、过氧化氢酶(CAT)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)活性水平显著高于疫苗组和对照组(P<0.05)。在D7—D14,香豆素+疫苗组血清中谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)水平被显著升高;而IHNV攻毒后(D15—D30),香豆素+疫苗组GPT和GOT水平显著低于对照组(P<0.05)。在接种疫苗和攻毒后,香豆素+疫苗组中脾脏的MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ和IFN-γ基因被显著上调(P<0.05);同时,香豆素+疫苗组CD4、CD8、IgT、C3、VIG1和Mx1基因表达量显著高于疫苗组和对照组(P<0.05)。结果表明,灭活疫苗联合佐剂香豆素是预防IHNV感染的有效方法,有助于进一步控制虹鳟养殖中的IHNV暴发。

摘要: 研究以异育银鲫为研究对象,通过16S rDNA高通量测序分析,探究武汉单极虫感染对其皮肤微生物物种组成、丰富度和多样性的影响。结果显示,健康组和感染组异育银鲫皮肤微生物共有30门、80纲、188目、295科、475属、692种、939个OTUs,其中健康组特有OTU数为308个,感染组特有OTU数为342个。根据α多样性分析发现,感染组微生物多样性较健康组显著升高、丰富度显著降低; β多样性分析发现,健康组和感染组皮肤微生物群落结构存在显著差异。比较分析发现,在门水平上,健康组和感染组优势菌门均为厚壁菌门(Firmicutes)、变形菌门(Proteobacteria)、蓝藻门(Cyanobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)和拟杆菌门(Bacteroidetes),但在丰富度上存在差异;在属水平上,丰富度在1%以上的有20个属级单元,健康组以乳球菌属(Lactococcus)为主,感染组以无色杆菌属(Achromobacter)为主,分别占各组总微生物数量的58.99%和48.67%。线性判别分析和功能预测发现,感染组中致病菌的丰富度和微生物潜在致病性较健康组显著增加。综上所述,武汉单极虫感染能够引起异育银鲫皮肤微生物失调和致病菌丰富度增加,进而可能导致细菌的继发感染。

摘要: 为探索全雌养殖大黄鱼(Larimichthys crocea)的生长性能及其对连续降温胁迫的响应,研究以正常繁殖的后代作为对照组[雌鱼体重:(14.01±2.52) g;雄鱼体重:(13.87±3.17) g],以全雌大黄鱼作为全雌养殖实验组[体重:(14.09±2.72) g],养殖周期120d,比较对照组雌鱼(CF)、对照组雄鱼(CM)和全雌养殖大黄鱼(AF)的生长性能并分析连续降温胁迫对其鳃和肠道的组织结构、免疫反应及肠道菌群的影响。结果显示,在30d和60d时, AF的体重与CF和CM相比均无显著差异;而在120d时, AF的末体重和增重率均显著高于CM,而与CF无显著差异。进一步的连续降温胁迫实验结果显示,随着温度的连续降低, CF、CM和AF的鳃细胞均出现空泡化、鳃丝严重变形;肠细胞融合、杯状细胞肿胀、黏膜细胞坏死和脱落; AF鳃和肠道组织中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及丙二醛(MDA)含量与CF和CM变化趋势相同,均呈现先显著升高后显著降低的趋势;在6℃时, AF鳃组织中SOD和CAT活性均显著低于CF和CM;AF肠道中CAT、GSH-Px活性及MDA含量也均显著低于CF和CM;免疫相关基因分析表明,在6℃时, AF鳃和肠道中IL-6基因的表达量均显著低于CF和CM;肠道菌群分析表明,低温胁迫显著影响CF和AF肠道菌群中优势门和优势属的相对丰度,而对CM无显著影响;低温胁迫显著影响CF、CM和AF肠道菌群网络结构组成。综上,全雌养殖大黄鱼具有较快的生长速度;低温胁迫可导致CF、CM和AF的鳃和肠道组织均出现损伤、氧化应激、炎症反应及显著影响肠道菌群网络结构。研究为大黄鱼全雌养殖模式的进一步研究提供参考依据。

摘要: 为了解析仿刺参(Apostichopus japonicus)夏眠期间肠道菌群结构特征,设置正常生长组(对照组, 15℃)和夏眠组(26℃),经过近3个月的养殖实验和先后7次采样,通过16S rRNA基因测序技术分析夏眠期间仿刺参肠道菌群多样性和结构动态变化。研究结果表明,夏眠组和正常组仿刺参肠道菌群丰度和多样性随采样时间均发生动态变化;仿刺参夏眠初期肠道菌群丰度和多样性较夏眠之前显著下降(P<0.05)。NMDS和Anosim分析表明正常组和夏眠组仿刺参肠道菌群结构存在显著性差异(P<0.05)。变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidota)、厚壁菌门(Firmicutes)、疣微菌门(Verrucomicrobiota)、放线菌门(Actinobacteriota)和弯曲杆菌门(Campylobacterota)为主要优势菌门,相对丰度为90.01%—99.80%。在属水平上,夏眠组和正常组的仿刺参肠道菌群结构组成存在明显差异,且优势菌属随采样时间动态变化。LEfSe分析共发现9个Biomarkers,其中正常组和夏眠组分别有7个和2个。共发生网络表明正常组仿刺参肠道菌群相互作用比夏眠组更加紧密和复杂。中性群落模型(NCM)分析表明仿刺参微生物群落的构建受到随机过程的影响较小,受确定性过程的影响较大。研究为阐明仿刺参夏眠提供了肠道菌群层面的解释,为仿刺参夏季健康养殖提供了理论依据。

摘要: 试验旨在探寻大鳞副泥鳅饲料配方中菜粕替代鱼粉的最佳比例。用菜粕替代饲料中不同比例0(P0)、10%(P10)、20%(P20)、30%(P30)、40%(P40)、50%(P50)的鱼粉,配制成菜粕含量分别为6.00%、8.50%、11.00%、13.50%、16.00%和18.50%的6种等能等氮饲料,投喂平均初始体重(5.09±0.01) g的大鳞副泥鳅8周,分析不同替代比例的菜粕对大鳞副泥鳅生长性能、抗氧化能力及肠道形态的影响。替代组(P10—P40)的增重率和特定生长率与对照组没有显著性差异(P>0.05), P50组则显著性下降(P<0.05);随着菜粕替代比例的上升,肠道过氧化氢酶CAT、超氧化物歧化酶SOD、总抗氧化能力T-AOC在各组间未见显著性差异(P>0.05),与P10组相比, P50组的丙二醛MDA含量最高且显著性增加(P<0.05), P40组与P10组相比碱性磷酸酶AKP活性呈显著性增加(P<0.05);随着菜粕替代比例的上升肝脏总蛋白TP、CAT、SOD活性均未见显著性差异(P>0.05),与对照组P0相比, P20组、P30组和P50组的MDA含量未见显著性差异(P>0.05), P10组和P40组的MDA含量呈现显著性差异(P<0.05),且P40组的MDA含量最低;随着菜粕替代比例的上升肠道的形态结构受到损伤,绒毛高度和隐窝深度逐渐减小, P50组的绒毛高度和隐窝深度达到最低(P<0.05),肌层厚度逐渐增大。饲料采用40%的菜粕替代鱼粉比例不会影响大鳞副泥鳅的增重率和特定生长率,但随着菜粕替代比例的上升对大鳞副泥鳅的抗氧化能力和肠道形态结构起到了负面影响。

摘要: 为研究低蛋白饲料中添加蛋氨酸对黄鳝(Monopterus albus)生长性能、肝脏健康及肠道菌群的影响,选取初始质量为(24.97±0.11) g的黄鳝为研究对象,配制42%(FM组)和36%(LP组)两种蛋白水平的饲料,并在LP组饲料基础上额外设置两个蛋氨酸剂量组:0.25%(Met1)和0.50%(Met2)。实验共设置4个处理组,每组3个重复,养殖实验进行56d。结果表明:(1)相较于FM组, LP组黄鳝的增重率、鱼体粗蛋白和粗脂肪含量显著降低,饵料系数显著升高。相较于LP组,蛋氨酸添加组黄鳝的生长性能得到改善,饵料系数显著降低;且Met2组黄鳝肠道淀粉酶、脂肪酶和蛋白酶活性显著上升。(2)相较于FM组, LP组黄鳝血清中血氨、尿素氮、谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平均显著上升。相较于LP组, Met2组黄鳝血清中各项指标水平均显著降低。(3)相较于FM组, LP组黄鳝肝脏过氧化氢酶、还原性谷胱甘肽与总抗氧化能力水平显著降低,丙二醛含量显著增加,并伴随着黄鳝肝脏结构受损;相较于LP组, Met2组黄鳝肝脏抗氧化能力提升,肝细胞形态完整,空泡化比例降低。(4)相较于FM组, LP组在门水平上变形菌门相对丰度显著下降,厚壁菌门与放线菌门相对丰度显著上升,属水平上葡萄球菌属(Staphylococcus)、分枝杆菌属(Mycobacterium)、甲基孢囊菌属(Methylosinus)相对丰度显著上升,不动杆菌属(Acinetobacter)相对丰度下降。相较于LP组,蛋氨酸的添加降低了黄鳝肠道中部分有害菌的相对丰度,另外Met2组具有最高的均匀度与丰富度。综上所述:低蛋白饲料会降低黄鳝生长性能,导致肝脏损伤和肠道菌群结构改变,添加0.5%蛋氨酸可缓解肝脏损伤,改善黄鳝生长性能和肝肠健康。

摘要: 研究运用组织学和对比试验等方法筛选静水压诱导三倍体勃氏雅罗鱼的最适条件。研究表明:(1)受精后5min的组织切片,可见第二极体明显突出于受精卵卵膜,准备排出第二极体。(2)诱导起始时间5min的受精率与对照组无显著性差异(P>0.05),但显著高于其他试验组(P<0.05);起始时间4min和5min的孵化率无显著差异(P>0.05),但均显著低于对照组(P<0.05),显著高于其他试验组(P<0.05);起始时间5min的三倍体率显著高于其他试验组(P<0.05)。(3)静水压压强60 MPa的受精率与对照组之间无显著性差异(P>0.05),但显著高于其他试验组(P<0.05); 65 MPa的孵化率显著低于其他各组(P<0.05), 50、55和60 MPa之间的孵化率无显著性差异(P>0.05),但均显著低于对照组(P<0.05); 60 MPa的三倍体率显著高于其他试验组(P<0.05)。(4)诱导持续时间4min与5min之间的受精率无显著性差异(P>0.05),但显著高于其他各试验组(P<0.05),显著低于对照组(P<0.05);各试验组的孵化率均显著低于对照组(P<0.05),持续时间4min的孵化率和三倍体率均显著高于其他试验组(P<0.05)。在实验条件下,当水温(17±1)℃时,三倍体勃氏雅罗鱼的最佳诱导条件为受精后5min,静水压强60 MPa,持续处理时间4min。

摘要: 文章探究0.107 mg/L (1/3 96h LD50)的汞暴露(汞胁迫组)及汞胁迫下饲料添加4%螺旋藻(汞+4%藻组)或8%螺旋藻(汞+8%藻组)对马口鱼(Opsariichthys bidens)生长性能、抗氧化、免疫指标和热休克蛋白表达的影响。在汞暴露两周后,汞胁迫组马口鱼的增重率和特定生长率都显著低于对照组,汞+4%藻和汞+8%藻组与对照组都无显著差异。养殖第2周,汞胁迫组马口鱼的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)活性及酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LZM)活性均显著低于对照组,丙二醛(MDA)含量显著增加;与对照组相比,汞+4%藻组马口鱼的CAT和T-AOC活性都显著降低, MDA含量显著增加, SOD、ACP、AKP、LZM活性均无显著变化;汞+8%藻组检测的所有抗氧化和免疫指标与对照组均无显著差异。养殖第1和第2周,汞胁迫下饲料添加4%或8%的螺旋藻均能显著提高马口鱼的热休克蛋白70和热休克蛋白90表达,其中8%添加量的效果最佳。总言之,高浓度汞暴露会抑制马口鱼的生长性能并降低抗氧化和免疫指标,饲料添加适量的螺旋藻(8%)能补偿马口鱼因汞胁迫被抑制的生长、抗氧化能力和免疫功能,同时提高马口鱼的抗应激能力。

摘要: 蓝藻是地球上最古老的光合放氧生物,也是全球初级生产力的重要贡献者,其固碳量约占全球总固碳量的四分之一。铁是蓝藻生长繁殖的必需微量元素之一,是许多关键生理反应的重要辅因子。作为光合生物,蓝藻比其他非光合生物对铁的需求更高,以满足光合电子传输和叶绿素合成的需要。尽管铁在地球环境中含量丰富,但其生物利用率往往很低,是限制全球初级生产力的重要因素。为了解决自身的高铁需求与环境中铁缺乏之间的矛盾,蓝藻在长期进化过程中逐渐形成了独特的缺铁适应机制,以满足其在铁限制条件下的生长需求。文章综述了蓝藻应对缺铁胁迫的一系列生理响应及对铁元素的吸收机制,并着重对蓝藻感应环境铁浓度的信号转导机制进行了概述,介绍了多种转录调控因子维持胞内铁稳态的分子机制。

摘要: 为探究红毛菜（Bangia fuscopurpurea）适应潮汐快速变化的机制,研究选取野生红毛菜品系CY作为实验对象,将红毛菜原叶体在5个失水梯度（WL0%、30%、60%和90%）及复水状态（先在90%失水状态下保持2h然后再复水）下保持2h,从生理和转录表达水平分析其对失水/复水处理的应答机制。结果显示:红毛菜超氧阴离子（O₂^-）、过氧化氢（H₂O₂）、丙二醛（MDA）、脯氨酸、可溶性糖、藻红蛋白和别藻蓝蛋白含量在失水时上升;超氧化物歧化酶（SOD）及最大光化学量子产率（F_v/F_m）在失水时下降;抗坏血酸过氧化物酶（APX）和过氧化物酶（POD）的活性在失水60%时显著升高后下降;而过氧化氢酶（CAT）无显著变化。在复水后,所有生理指标均恢复至未失水处理下的水平。此外,通过差异表达基因（DEGs）富集分析,发现核糖体蛋白和热激蛋白相关基因在失水过程中上调表达,而氨基酸合成等相关基因在复水后下调表达。综上所述:红毛菜通过调节抗氧化酶活性及合成失水耐受相关核糖体蛋白等防御功能以应答失水胁迫;在复水过程中,通过抑制核糖体蛋白质合成及增强光合作用供给能量和转运有毒代谢产物以帮助红毛菜恢复生理代谢活动。研究可以加深对潮间带海藻应答失水胁迫的认识,以及为红毛菜耐干良种选育提供数据参考。